Arf6在恶性肿瘤细胞上皮型钙粘蛋白内化及上皮-间质转化中作用及机制研究

恶性肿瘤细胞发生上皮-间质转化(EMT)是恶性肿瘤细胞易于脱落和游离，进而实现其浸润和转移的关键。内皮型钙粘蛋白(E-cad)是实现上皮细胞-细胞间粘附的关键蛋白，其在外界因子刺激下的内化和降解是恶性肿瘤细胞中E-cad含量下调及EMT发生的重要原因，然而恶性肿瘤细胞E-cad内化的分子机制远未阐明。Arf6作为细胞骨架结构和功能以及细胞质膜转运的关键调控分子参与了EMT过程，但其在E-cad内化以及EMT过程中的作用及确切的调控途径远未阐明。本研究致力于：(1)哪些GEF调控Arf6的活化，进而参与E-cad的内化？(2)Arf6下游哪些信号分子中介E-cad的内化？本研究以期在Arf6活化和Arf6对E-cad内化调控途径上阐明Arf6在恶性肿瘤细胞EMT发生中的作用和作用机制。

在上皮来源的恶性肿瘤发生和发展过程中，恶性肿瘤细胞易于从原发灶脱落的关键是恶性肿瘤细胞发生上皮-间质转化（EMT）及定向迁移。EMT及定向迁移是启动恶性肿瘤细胞最终实现转移的关键，也是抗肿瘤药物临床应用失败的重要原因之一。本研究致力于研究恶性肿瘤细胞微环境改变时，Arf6及小G蛋白家族成员Rac1、RhoA在恶性肿瘤细胞EMT及定向迁移过程中的作用及可能的调控机制。研究发现：1、Arf6在胃癌细胞EGF和Wnt5a这两条重要信号通路间的交互调控及EMT进程中具有重要作用；2、确定PI3K/Akt-GSK3β-RhoA信号通路中介Wnt5a诱导的胃癌细胞的迁移；3、确定在MCF-7乳腺癌细胞中，Wnt5a/Dvl2信号通路通过调节Rac1活性调控细胞迁移，而不是通过RhoA。在MDA-MB-231乳腺癌细胞中，除了RhoA，Wnt5a/Dvl2信号通路，Wnt5a还能通过Rac1调节细胞迁移，并且Rac1的活化作用可以不经过Rab35介导；4、确定GEP100-Arf6调控的ERK1/2-uPAR-Rac1信号通路中介EGF诱导的MDA-MB-231乳腺癌细胞和HepG2肝癌细胞的迁移。本研究为阐明Arf6及小G蛋白信号通路对恶性肿瘤远处转移的调控提供了新的实验依据。