基于多巴胺D2受体介导的cAMP/PKA/CREB信号通路的大麦芽碱抗高泌乳素血症作用及机制研究

Hyperprolactinemia hurts women's reproductive health seriously,Fructus Hordei Germinatus is usually used for treating hyperprolactinemia patients in clinical effectively without side effects.However,the active components and mechanism of Fructus Hordei Germinatus for treating hyperprolactinemia has not been clear.Our previous studies found that Fructus Hordei Germinatus and total alkaloids of Fructus Hordei Germinatus all could inhibited PRL secretion significantly in hyperprolactinemia rats,and it was related with regulating dopamine D2 receptor, cAMP and PKA levels.The major component hordenine of total alkaloids of Fructus Hordei Germinatus showed the activity of inhibiting prolactin secretion in rat pituitary tumor MMQ cells.Based on the previous work basis,we suppose that "hordenine treats hyperprolactinemia via G protein signaling pathway(dopamine D2 receptor-mediated cAMP/PKA/CREB)".We will observe the effect of inhibiting prolactin secretion of hordenine by blocking the different links of dopamine D2 receptor-mediated cAMP/PKA/CREB signaling pathway at the two aspects of animal and in vitro cell.Thus, we will reveal the anti-hyperprolactinemia effect and mechanism of hordenine,and elucidate the active components of Fructus Hordei Germinatus for laying foundation for new drug development of treating hyperprolactinemia.

高泌乳素血症严重危害妇女生殖健康，中药麦芽常用于临床高泌乳素血症患者的治疗，疗效确切且无副作用。但是，麦芽治疗高泌乳素血症的活性成分和作用机制尚不明确。本课题组前期研究发现，麦芽和麦芽总生物碱均可显著抑制高泌乳素血症大鼠分泌泌乳素，此作用与调节多巴胺D2受体、cAMP和PKA等相关；麦芽生物碱主要成分大麦芽碱具有抑制大鼠垂体瘤细胞MMQ细胞分泌泌乳素的活性。基于前期工作基础，申报者以“大麦芽碱通过G蛋白信号通路（多巴胺D2受体介导的cAMP/PKA/CREB）而对高泌乳素血症发挥治疗作用”为研究假说，拟在整体动物和离体细胞两个层面上，通过阻断多巴胺D2受体介导的cAMP/PKA/CREB信号通路的不同环节，观察对大麦芽碱抑制泌乳素分泌作用的影响，揭示大麦芽碱抗高泌乳素血症的作用及机制，从而阐明麦芽治疗高泌乳素血症的活性成分，为抗高泌乳素血症新药的研究开发奠定基础。

高泌乳素血症和垂体泌乳素腺瘤严重危害人类生殖健康，易导致女性闭经、不孕不育等。然而，其发病机制尚不完全清楚，且临床治疗药物溴隐亭作用靶点为多巴胺D2受体，20%的患者耐药性和副作用明显，急需研发新药上市。传统中药麦芽治疗高泌乳素血症已有数千年的历史，在该国家自然科学基金的资助下，我们研究了如下内容：（1）大麦芽碱对高泌乳素血症模型大鼠的药效作用和机制；（2）大麦芽碱对垂体泌乳素腺瘤和促肾上腺皮质激素腺瘤模型大鼠的药效作用和机制；（3）大鼠血浆中大麦芽碱的HPLC法测定研究；（4）大麦芽碱的毒性实验研究。结果显示：麦芽中主要活性成分大麦芽碱能显著抑制高泌乳素血症；MAPK信号通路参与并促进了垂体泌乳素腺瘤和促肾上腺皮质激素腺瘤的发生，抑制MAPK14蛋白可显著改善泌乳素腺瘤的增长和泌乳素的过度分泌；大麦芽碱能显著抑制泌乳素腺瘤的过度增长和PRL的分泌，作用机制为调控MAPK通路的活化；成功建立了大鼠血浆中大麦芽碱的HPLC方法；大麦芽碱无明显的毒副作用。本项目首次发现MAPK信号通路促进了垂体泌乳素腺瘤和促肾上腺皮质激素腺瘤的发生，且抑制MAPK14可显著治疗泌乳素腺瘤；而且来源于传统中药麦芽的活性成分大麦芽碱抗泌乳素腺瘤作用显著，作用靶点为MAPK通路。本研究成果为寻找治疗泌乳素腺瘤和促肾上腺皮质激素腺瘤的新靶点以及开发具有我国自主知识产权的新药提供了依据。本项目研究成果已经申请了发明专利，后期力争将大麦芽碱开发成治疗泌乳素腺瘤的一类新药上市。