基因治疗法增强正常组织对亚硝脲药物抗性的基础研究

保护正常组织是化疗需要解决的问题。本研究的目的是将O-(6)甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）基因导入造血细胞，增强其对亚硝脲药物的抗性。将MGMT cDNA构建到逆转录病毒载体上，导入K562细胞，用嘧啶亚硝脲（ACNU）筛选，发现转导细胞K562-MGMT+的MGMT mRNA和蛋白表达水平大幅度提高，对ACNU的抗性增强12.2倍。在此基础上，将SF-MGMT导入骨髓造血细胞。RT-PCR实验证实转导细胞MGMT mRNA水平增加了22倍，FACS检测提示23.5%骨髓细胞表达MGMT蛋白，CFU-GM实验证实骨髓细胞对ACNU的敏感性提高了4倍以上。说明新型逆转录病毒载体SF-MGMT能够将MGMT cDNA高效地导入骨髓造血细胞，增加其对亚硝脲化疗药物的耐受性，为保护正常组织，提高化疗水平打好基础。