从VEGF—Ang级联信号通路探讨“冠心1号”双向调节血管新生的机理

Coronary atherosclerotic heart disease (CHD) is a medical problem, the application of drugs to promote the ischemic area of angiogenesis and inhibition of plaque angiogenesis is the current hot spots, but the inconsistencies between the two. Group based on the pathological features of angiogenesis and preliminary research base (Guanxin 1 Hao two-way adjustment angiogenesis), proposed the TCM Pathogenesis of angiogenesis is mainly Qi and Yin deficiency, both phlegm and blood stagnation, chest Yang Blockage and using Guanxin 1 Hao to treat which was proved effective. On the basis of preliminary studies, we speculate that the mechanism of action Guanxin 1 Hao of two-way regulation of angiogenesis may be related to VEGF-Ang cascade signaling pathway. This project through the establishment of myocardial infarction, angiogenesis, and plaque angiogenesis model (cells, animals), using molecular biology techniques, detection of VEGF, of Ang1, of Ang2 of Tie2 protein and mRNA expression, and to explore the Guanxin 1 Hao of the pathway conditioning effect, in order to reveal the molecular mechanism of the party's two-way regulation of angiogenesis, rich in traditional Chinese medicine treatment of coronary heart disease therapeutic principle theory, provide a new treatment of coronary heart disease angiogenesis an effective means for clinical.

冠状动脉粥样硬化性心脏病（CHD）是医学难题，应用药物促进缺血区血管新生和抑制斑块内血管新生是当前热点，但两者有相互矛盾之处。课题组立足血管新生的病理特征和前期研究基础（冠心1号具有双向调节血管新生作用），提出血管新生的中医病机主要是"气阴两虚，血瘀痰阻，胸阳痹阻"，并应用基于该认识的临床治疗冠心病心绞痛有效的"冠心1号"治疗。在前期研究基础上我们推测冠心1号双向调节血管新生的作用机制可能和VEGF-Ang级联信号通路有关。本课题通过建立心梗血管新生和斑块内血管新生模型（细胞、动物），采用分子生物学技术，检测VEGF、Ang1、Ang2、Tie2蛋白和mRNA表达，并探讨冠心1号对该通路的调节效应，以期揭示本方双向调节血管新生的分子机理，丰富中医治疗冠心病的治则治法理论，为临床提供一种新的治疗冠心病血管新生有效手段。

冠心病是成为严重威胁人类健康的疾病，应用药物促进心梗后血管新生和抑制动脉粥样硬化斑块内血管新生具有重大临床意义。前期研究提示：冠心1号方科可促进心梗后大鼠缺血心肌血管新生，同时可减少动脉粥样硬化斑块内血管新生，且与VEGF相关。多位专家研究发现：Ang-2对血管生成可能具有双向作用， VEGF存在时，Ang-2与Tie-2结合促进新生血管形成；VEGF缺乏时，Ang-2则因其阻断Ang-l与Tie-2结合，有利于血管的消退。本研究是为了揭示冠心1号双向调节血管新生的作用机制是否与VEGF-Ang/Tie2相关信号通路有关。.本课题通过建立冠脉结扎致心肌梗死新西兰兔、高脂饮食+球囊损伤致动脉粥样硬化斑块内血管新生模型、H2O2刺激制备内皮细胞损伤模型，采用分子生物学技术，检测VEGF、Ang1、Ang2、Tie2蛋白和mRNA表达，并探讨冠心1号对该通路的调节效应。.体内实验研究提示：兔心梗后缺血心肌存在血管新生，冠心1号方可促进心梗后缺血心肌血管新生，且可能通过上调VEGF、Ang1、Tie2，下调Ang2起作用；冠心1号方可抑制兔股动脉粥样硬化斑块内血管新生，可能通过下调VEGF、Ang1、Tie2，上调Ang2起作用。.体外实验通过引入VEGF-siRNA，以揭示VEGF、Ang1、Ang2、Tie2之间的关系，结果提示：H2O2可引起VEGF的上调，Ang1、Tie2基因的上调，不能使Ang2上调；VEGF-siRNA可引起VEGF的下调，VEGF下调可使Ang1、Ang2、Tie2上调，中药血清可使VEGF、Ang1、Tie2的下调，Ang2上调。与体外实验结果一致。.提示冠心1号通过调节VEGF、Ang1、Ang2、Tie2相关信号通路起双向调节血管新生的作用，但与既往文献研究不一致的是：Ang2抑制血管新生的机制并不是和Tie2结合产生，因为体内外研究提示此时Ang2上调，而Tie2下调，提示可能存在其他与Ang2相关信号通路在其中发挥作用，还需要进一步研究。.冠心1号双向调节血管新生的分子机理与调节VEGF、Ang1、Ang2、Tie2相关信号通路有关，且VEGF、Ang1与Ang2存在相反调节作用。为中医药双向调节血管新生提供实验室证据和思路，同时有利于丰富中医治疗冠心病的治则治法理论，为临床提供一种新的治疗冠心病血管新生有效手段。