核糖体相关辅助伴侣分子-HSPA和MPP11调控树突状细胞分化发育的机制研究

The differentiation and development of dendritic cell (DC) are key to the balance between immune response and homeostasis. It is a leading study on the integrating mechanisms of transcriptional factors, transcription regulatory factors and epigenetic factors in the cellular differentiation and development. The heterodimer subunits-HSPA14 and MPP11 consist of ribosome-associated complex to play "cochaperon" roles, and MPP11 is a novel identified epigenetic regulatory factor in cellular differentiation. However, how to transform to transcriptional regulation from "cochaperon" by MPP11 is still unknown. We previously observed that the dynamic expression and effects on the differentiation of monocytes into DCs (MoDC) were similar between HSPA14 and MPP11, and that the role by HSPA14 is strongly linked to the role of MPP11 in the differentiation of MoDC. So, we will investigate what modified HSPA14 regulates the expression, modification, translocation from cytoplasma to nucleus and transcriptional regulation of MPP11 in the differentiation of MoDCs. The study not only explores the novel functions of HSPA14 and MPP11, and deepens the knowledge on the differentiation of DCs, but also provides the novel basis for the future study on the cellular differentiation and the development of myeloid leukemia.

树突状细胞(dendriticcell，DC)的正常分化是保证免疫应答和免疫自稳平衡的关键。细胞如何行之有效地组织特定转录因子、转录/表观调控因子调控细胞分化是当前的热点研究方向。“辅助伴侣”作用是组成核糖体相关复合物的异二聚体-HSPA14和MPP11的功能，MPP11还是一个新认定的、调控细胞分化的表观调控因子。然而，MPP11在 “辅助伴侣”和表观调控之间进行功能转换的机制不明。我们前期研究发现，HSPA14和MPP11在单核来源DC分化中具有等同的动态表达、负向调控作用，二者对MoDC的调控作用具有联动性。本课题拟从鉴定处于分化的MoDC 的HSP14和MPP11的修饰入手，探讨HSPA14对MPP11表达、修饰，胞浆/胞核转运和表观调控功能的影响。研究不仅发掘HSP14和MPP11的新作用，加深对DC分化的认识，还为细胞分化的转录调控机制以及髓系白血病致病机制拓展了新的研究基础。

树突状细胞(dendriticcell，DC)的正常分化是保证免疫应答和免疫自稳平衡的关键。细胞如何行之有效地组织特定转录因子、转录/表观调控因子调控细胞分化是当前的热点研究方向。HSPA14是我们首先发现的热休克蛋白家族分子，HSPA14及其伴侣DNAJC2组成核糖体相关复合物（RAC）的异二聚体，DNAJC2还是一个调控细胞分化的表观调控因子。然而，HSPA14和DNAJC2在 “辅助伴侣”和表观调控之间进行功能转换的机制不明。.在以上科学问题指引下，我们发现HSPA14和DNAJC2在DC分化中具有相似的表达动态学，即分化早期先降低在中晚期后升高的特征；二者的相互作用有助于稳定各自的表达，并都能负向调控DC的分化成熟。.对HSPA14和DNAJC2负向调控DC分化成熟的分子机制探索发现，HSPA14和DNAJC2抑制STAT3信号活化，促进抑制性表观修饰H3K27me3和H2AK119Ub和抑制活化型组蛋白H3K4me3的表观修饰，以及抑制活化转录的Ash1l的表达、核转位，通过上述分子机制来实现调控共刺激分子、MHC II和STAT3基因的表达，最终调控DC的成熟。.总之，以上研究发现了机体维持免疫自稳的作用机制和分子机制，并且还揭示了组成RAC的新功能，揭示了细胞在分化成熟过程中网络调控的复杂性。.在以上基础理论研究的支撑下，通过优化靶向DNAJC2和HSPA14在时相和表达剂量的技术体系，建立了制备耐受型和刺激型DC的技术方案，为基于DC的细胞免疫治疗相关疾病奠定了技术基础。.我们还发现了一个尚未报道的LncRNA，由DNAJC2基因编码，该LncRNA的形成是DNAJC2基因转录后内含子滞留导致，初步研究发现DNAJC2-LncRNA为DNAJC2基因第8内含子滞留，在此基础上又发现了含有DNAJC2第4内含子滞留，以及同时包含第四和第八内含子滞留的LncRNA，为后续研究DNAJC2基因调控DC提供了新的研究线索。.我们还优化了一种来源于hPEBP4的HLA-A2.1限制性表位肽，优化后的表位肽能够诱导更强烈的CTL反应，明显的抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长并促进其生存。.综上，我们按计划完成了研究任务，发表相关论文3篇，其中两篇发表在Celllular & Moelcular Immunolgy，一篇综述；申报专利一项。