SOCS-3基因多态性与CHC合并胰岛素抵抗的功能研究

Chronic Hepatitis C(CHC) induces insulin resistance (IR). There are evidences show that HCV core protein increases levels of suppressor of cytokine signaling 3 (SOCS-3).Our previous study suggested that SOCS-3 gene polymorphism rs4969170 AA genotype is associated with IR. This research will focus on study the polymorphisms of SOCS-3 and its mechanisms in the IR in CHC: 900 enrolled subjects, including 300 chronic hepatitis C patients with IR,300 patients without IR, and 300 healthy adults, will be genotyped for the eight SNPs of SOCS-3; We will evaluate the SOCS-3 mRNA and protein level in PBMCs according to three genotypes of the significant SNPs , 60 cases in every group; The effect of SOCS-3 on the promoter activity and the binding ability of transcription factor capacity with SOCS-3 promoter will be observed. Also, we observe the expression asociation of IRS-1/2 mRNA and protein with SOCS-3 expression in PBMCs. We will investigate the mechanisms of SOCS-3 polymorphisms in IR in CHC patients.

慢性丙型肝炎(CHC)可引起胰岛素抵抗。研究提示，HCV核心蛋白可促进SOCS-3表达上调，诱发胰岛素抵抗。我们的前期研究提示，SOCS-3 rs4969170AA 基因型是胰岛素抵抗的危险因素之一。课题拟研究SOCS-3基因多态性与CHC合并胰岛素抵抗的关联性及致病机制:收集CHC合并胰岛素抵抗者300例，CHC非胰岛素抵抗者300例，健康人300例，检测SOCS-3 8个基因多态性位点的基因型，分析CHC诱发胰岛素抵抗的相关基因多态位点；根据关联分析的多态性位点按基因型结果分三组，每组60例，观察不同基因型对外周血单个核细胞SOCS-3 mRNA及蛋白表达、启动子转录活性、启动子与转录因子结合能力及所结合的不同转录因子的影响；分析三组基因型患者胰岛素受体底物-1/2与SOCS-3表达趋势的相关性，与胰岛素抵抗的关系，探讨SOCS-3基因多态性在CHC合并胰岛素抵中的作用机制。

慢性丙型肝炎(CHC)可引起胰岛素抵抗。研究提示，HCV核心蛋白可促进SOCS3表达上调，诱发胰岛素抵抗。我们的前期研究提示，SOCS3 rs4969170AA 基因型是胰岛素抵抗的危险因素之一。本课题研究了SOCS3基因多态性与CHC合并胰岛素抵抗的关联性及致病机制: 收集290例未抗病毒治疗的慢性丙型肝炎患者,根据HOMA-IR的检测值,分为胰岛素抵抗组103例(HOMA-IR≥2.5)和非胰岛素抵组187例，进行SOCS3 SNPs(rs4969168, rs4969170, rs12952093)基因分型检测；扩增目的基因片段，通过双酶切连接法将含SOCS3 rs4969170 A／G的启动子区序列克隆到pGL3-basic载体，用构建好的pGL3-SOCS3 rs4969170 A／G重组质粒转染HepG2、Huh7细胞，检测荧光素酶相对表达活性；用Western blot检测携带SOCS3 rs4969170 AA／AG基因型患者外周血单个核细胞中SOCS3蛋白表达水平；采用胰岛素抵抗的稳态评估模型评估携带SOCS3 rs4969170 AA／AG基因型患者的胰岛素抵抗状态。结果显示SOCS3 SNPrs4969170AA基因型和A等位基因与CHC合并IR的发生具有显著相关性，多因素Logistic回归分析提示,rs4969170AA基因型是CHC合并IR的危险因素之一；rs4969170 A／G位点的变异可能影响了SOCS3基因的转录活性及其蛋白的表达，从而干扰胰岛素信号通路，参与慢性丙型肝炎患者胰岛素抵抗的发生；携带AA基因型慢性丙型肝炎患者胰岛素稳态评估模型的胰岛素抵抗值高于携带AG基因型的模型。