用于肺部结节鉴别诊断的硫氧过氧化物酶分子靶向显像剂的研究

肺部肿瘤和肺结核都是威胁我国人民生命健康的重要因素。对这两种疾病的准确鉴别与诊断是正确制定治疗方案、改善预后，以及挽救患者生命的重要基础。核医学显像可以实现分子水平的功能性显像，对于肺部结节良恶性鉴别较之常规的形态学影像，在准确度和灵敏度方面都具有显著优势。Peroxiredoxin蛋白是新近发现的一类硫氧过氧化物酶，不仅具有抗氧化作用，而且在肺部肿瘤中具有高表达，但尚未发现其与肺部良性结节有关。该蛋白在肺部肿瘤和肺部良性结节组织中的表达具有显著差异，可以作为肺部结节良恶性诊断的靶点。本研究将探讨该蛋白在肺部肿瘤组织，以及肺结核、肉芽肿等非肿瘤组织中的表达情况。采用放射性核素标记的抗Peroxiredoxin单克隆抗体（mAb109）作为分子探针，研究该标记抗体的生物学性质、对肺部肿瘤的靶向性和在肺部良性病变组织中的生物学行为。从而采用核医学显像的手段，实现对肺部结节良恶性的准确鉴别。

本项目主要研究了核素标记的mAb109单克隆抗体药物的制备及其在肿瘤诊断，特别是肺部肿瘤与炎症鉴别诊断中的应用。通过向Balb/C小鼠腹腔注射1×106 的 109 细胞，产生腹水后于7-10日进行收集，而后以饱和硫酸铵沉淀腹水，通过进一步的纯化，通过SDS-PAGE 验证得到单一的蛋白，并测定浓度，即得具有肿瘤特异性的单克隆抗体mAb109。而后通过化学/生物学修饰，在有效增加其生物相容性及亲和力的前提下，获得可用于核素标记的肿瘤靶向的分子探针前体Ab109，而后分别与诊断用核素（如99mTc, 111In）进行放射性标记，获得相应的99mTc, 111In-mAb109分子探针。借助于分子影像设备，用于肿瘤的早期诊断与肿瘤发生部位精确定位。不仅如此，还通过将其与红外分子Cy5.5偶联获得相应的红外分子探针，借助于小动物红外设备，进行炎症与肿瘤对比研究。总之，通过对mAb109单克隆抗体的制备、分子修饰及标记获得的核素标记的mAb109分子探针，能够与广泛表达在肿瘤进行抗原特异性结合。通过各种核素的特性，能达到肿瘤早发现、早诊断、早治疗及个体化治疗的目标。. 经过四年的研究，已经圆满完成了所有计划项目。. 主要包括1. 通过免疫组化方法获得了肺部肿瘤及相关炎症样本的表达情况。以及相关标记单抗的肿瘤细胞亲和力分析情况； . 2. 获得了两种核素标记的mAb109单克隆抗体，及有红外基团标记Cy5.5的mAb109单抗，其表现出较好的放化与生物学活性；. 3. 通过皮下注射的方法建立了肿瘤模型及炎症模型，并实现了在同一只动物上种植两种模型。通过静脉注射，评价了mAb109探针在动物体内的摄取的情况等一系列工作。达到了本项目立项时提出的建立单克隆抗体放射性标记、分析、生物活性评价和动物活体评价的技术平台的总体目标。.本项目为通过核医学显像剂临床转化进行肺部结节良恶性评价奠定了坚实的理论基础。