靶向结核杆菌细胞壁ManLAM的多肽型显像剂，用于鉴别诊断结核病灶与肿瘤病灶的实验研究

虽然我们有CT、MR、PET/CT等尖端影像学手段，但肿瘤病灶与结核病灶的鉴别诊断仍然是临床医师经常面对的难题，结核分枝杆菌"特异性"显像剂可以解决这一难题。以结核分枝杆菌细胞壁特异性抗原ManLAM（甘露糖帽-脂阿拉伯甘露聚糖）作为分子靶点，合成与ManLAM特异性结合的多肽，是最有潜力的人体内结核病灶、肿瘤病灶鉴别诊断显像剂。课题组已经合成2种与ManLAM特异性结合的多肽（经噬菌体肽库筛选后人工合成，多肽-ManLAM结合实验验证特异性）。本课题的主要任务是体外实验研究ManLAM结合肽与结核分枝杆菌结合的特异性；设置哺乳动物细胞，其他分枝杆菌（耻垢杆菌、海龟分支杆菌），金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌A型、肺炎球菌作为对照参与实验；目标是获得与结核分枝杆菌高特异结合的多肽。体外实验中与结核分枝杆菌特异性结合的多肽，有潜力"靶向示踪"体内的结核杆菌，用于结核病灶和肿瘤病灶的鉴别诊断。

目的：部分患者鉴别结核与肿瘤有困难，鉴别不清将导致过度检查、延误治疗、错误用药。寻找肿瘤特异性示踪剂无果，18F-FDG PET/CT不能鉴别结核与肿瘤。因此我们寻求结核特异性显像剂。方法：1、被迫放弃靶向ManLAM：ManLAM只能从人结核杆菌中提取，成都没有3P实验室，与武汉一家3P实验室谈判合作未能如愿。2、标记细菌的氮源--酰胺：注射到动物体内的无机氮（131I标记酪氨酰氨）优先被感染细菌摄取，因而可以作为示踪剂追踪细菌鉴别小鼠无菌性炎症和细菌感染。3、巨噬细胞示踪：用放射性同位素标记淋巴细胞靶向肿瘤病灶，从而鉴别结核与肿瘤。我们从德国买回99mTc-HMPAO试剂盒，预实验标记小鼠淋巴细胞没能成功。我们将继续探索标记条件，应该能标记。4、研究LAMP法快速检测TSHR mRNA，用于随访分化型甲状腺癌（DTC）。我们建立了LAMP法快速检测患者血清中TSHR mRNA。该方法培养了硕士研究生1人，2013年春天答辩，论文尚未发表。5、研究DTC患者内源性TgAb对Tg测定值。已经发表论文和会议文摘数篇，其中1篇为研究生发表。重要成果：1、不局限于申报的研究思路，3年内大量阅读文献、思考、分析、尝试，对结核、肿瘤、营养学、细胞示踪等方面的认识大大提高。2、尝试了放射性标记酰胺类物质，发表了论文。实验证明，131I-酪氨酰氨鉴别细菌感染与无菌性炎症效果好，论文已在《生物医学工程学杂志》上发表。同时我们标记了131I-酪氨酸（有机氮），鉴别效果不好，因而没有投稿。现在反省这个结果认为可以投稿。3、探索99mTc-HMPAO标记淋巴细胞诊断肿瘤，其科学意义大于临床目的。因为流式细胞分离淋巴细胞亚群，干细胞移植技术都需要做细胞标记。虽然研究处于起步阶段，未来可能对再生医学、免疫学有重大影响。4、分化型甲状腺癌患者的TgAb干扰Tg研究，TgAb越高，对Tg测定值干扰越大，但二者间为非参数相关关系；且个体间差异极大；因此不能用TgAb浓度预测Tg干扰程度。研究还预测了干扰Tg测定的最小TgAb浓度，最大干扰幅度。稿件被拒，要求增加患者数量，我们考虑换杂志。LAMP法测定TSHR mRNA培养了1名研究生，临床数据不满意，与文献上“好”结果出入较大，但我们还是计划发一篇文章。5、项目培养了2名研究生，一位即将毕业，一位在读。关键数据及其科学意义：131I-酪氨酰氨诊断