新型有机硒化合物协同TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）能选择性诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞无毒性作用，因此被认为是未来最理想的抗肿瘤药物之一。然而，原发性及获得性耐药极大的限制了TRAIL的临床应用前景。因此，寻找TRAIL的化疗增敏剂具有重要的科学意义和应用价值。本项目拟以A375黑色素瘤和MCF-7乳腺癌细胞作为模型，评价硒代胱氨酸及其衍生物对TRAIL的增敏作用，并深入阐述此协同作用的分子机制。着重检测p53的翻译后修饰，筛选特异性磷酸化和乙酰化氨基酸位点，鉴定激活p53信号通路的上游激酶；通过Western blot、PCR及siRNA等技术研究p53与其下游靶基因的相互作用，揭示不同信号转导通路在协同增敏作用中的重要性，阐明p53信号通路与死亡受体凋亡途径和线粒体介导的凋亡途径的窜扰。本项目的研究结果将为进一步开发新型有机硒增敏剂提供理论和实验依据，同时也为肿瘤的协同治疗提供新的思路。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）能选择性诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞无毒性作用，因此被认为是未来最理想的抗肿瘤药物之一。然而，原发性及获得性耐药极大的限制了TRAIL的临床应用前景。因此，寻找TRAIL的化疗增敏剂具有重要的科学意义和应用价值。本项目以A375黑色素瘤和MCF-7乳腺癌细胞作为模型，评价硒代胱氨酸及其衍生物对TRAIL的增敏作用，并深入阐述此协同作用的分子机制。本项目的研究结果将为进一步开发新型有机硒增敏剂提供理论和实验依据，同时也为肿瘤的协同治疗提供新的思路。.(1).阐明了有机硒抗肿瘤作用的机理：有机硒能高效、选择性地抑制多种肿瘤细胞的增殖；Caspases活化、Bcl-2家族蛋白表达的改变、线粒体跨膜电位的消散和细胞氧化损伤均参与了细胞凋亡过程的调控。.(2).阐明了p53信号通路参与调控硒杂环化合物诱导肿瘤细胞凋亡的机制。重点的用Western blot法检测了不同凋亡相关蛋白的表达及翻译后修饰，筛选特异性磷酸化氨基酸位点，鉴定激活p53信号通路的上游激酶及下游靶基因，阐明了p53信号通路与死亡受体凋亡途径和线粒体介导的凋亡途径的窜扰。.(3).研究ROS产生、DNA损伤及p53活化等凋亡相关事件在细胞中发生的时间顺序，并鉴定相关的上游激酶。在此基础上，利用多种ROS抑制剂的特异性作用，明确ROS及其诱导的DNA损伤在p53信号通路上所扮演的角色。.(4).关于硒芳香杂环化合物对常规抗肿瘤药物的增敏作用的研究是本项目的另一个重要创新点，此项研究可为肿瘤的协同化疗提供了新的思路。本项目所设计合成新型硒杂环化合物的体内外抗肿瘤活性明显优于常用的亚硒酸钠、硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸和甲基硒酸。在此基础上，我们深入的阐述了其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制，具有深刻的理论意义及应用价值。目前关于硒化合物诱导的肿瘤细胞凋亡的分子机制研究主要集中在线粒体介导的内源性凋亡路径上。本课题的研究重点为p53信号通路及其在硒杂环化合物诱导的细胞凋亡机制中的作用。深入研究p53的翻译后修饰，筛选特异性磷酸化和乙酰化氨基酸位点，并鉴定相关的p53下游靶基因，并阐述p53信号通路与死亡受体途径和线粒体途径的窜扰，这是本项目的重要创新之处。.(5).所获得的成果超过了预期的目标：目前已发表SCI论文25篇，申报专利4项，培养博士生3名，硕士生8名。