柚皮苷对慢性阻塞性肺疾病气道炎症消退的调控作用及机制研究

Naringin is the authentic and effective monomer of pummelo peel from genuine medicinal materials in Guangdong Province, which has been reported to exhibit antitussive and expectorant effects. Our recent studies have demonstrated that, naringin also showed good protective effect against the chronic airway inflammation of chronic obstructive pulmonary disease (COPD), and the protective effect was correlative with the promotion of inflammation resolution. The regulation effect and mechanism of naringin on the airway inflammation resolution of COPD is still a gap. This research issue is carried out to solve this problem, which main contents: (1) Using a variety of cell models, to investigate the regulation of naringin on the polymorphonuclear neutrophils(PMN) apoptosis and its phagocytosis by alveolar macrophage; using a variety of animal models, to study the regulation of naringin on the airway inflammation resolution progress during the formation and acute exacerbation of COPD. (2) Using PMN and HL-60 cells, to explore the effects of naringin on the lipid mediator class switching of PMN; Using the NR8383 cell-PMN coculture model and A549 cell-HL-60 cell coculture model, to explore the effect of naringin on the intracellular synthesis of lipoxin. Using HL-60，NR8383 and A549 cells, to explore the effects of naringin on the expression and internalization of lipoxin receptor.

柚皮苷是我们从广东道地药材化橘红中提取的有效单体，具有显著的止咳化痰作用。我们的最新研究表明：柚皮苷还能显著抑制慢性阻塞性肺疾病（COPD）气道炎症，且其抑制作用与促进炎症消退有关。但柚皮苷对COPD气道炎症消退的调控作用及机制，还是一个空白点。本课题正是针对这一问题而开展研究的。主要研究内容：（1）采用细胞模型，研究柚皮苷对PMN凋亡及肺泡巨噬细胞吞噬凋亡细胞能力的影响。采用动物模型，研究柚皮苷对COPD形成期及急性发作期气道炎症消退的调控作用。(2)采用PMN及HL-60细胞，研究柚皮苷对细胞脂质介质合成类别转换的影响。采用NR8383细胞-PMN，A549细胞-HL-60细胞共培养模型,研究柚皮苷对脂氧素类细胞间协同合成的影响。采用HL-60细胞、NR8383细胞及A549细胞，研究柚皮苷对脂氧素受体表达和内吞的影响。

柚皮苷是我们从广东道地药材化橘红中提取的有效单体，具有显著的止咳化痰作用。我们的最新研究表明：柚皮苷能显著抑制慢性阻塞性肺疾病（COPD）气道炎症，且其抑制作用与促进炎症消退有关。但柚皮苷对COPD气道炎症消退的调控作用及机制，还是一个空白点，本课题正是针对这一问题而开展研究的。通过动物及细胞模型，运用多种生物学检测技术，阐明了柚皮苷的消炎作用机制，深入探讨了柚皮苷对慢性阻塞性肺疾病气道炎症以及气道上皮、气道平滑肌的调控作用及药效机制，系统考察了柚皮苷在人体的代谢及排泄情况。结果如下：.(1)在消炎作用方面：柚皮苷在发挥抗COPD慢性气道炎症作用的同时具有一定促进炎症消退的作用。一方面，柚皮苷显著抑制BALF中促炎因子IL-8水平、减少中性粒细胞浸润，同时抑制抗炎因子IL-10的降低，促进ALX受体表达；另一方面，柚皮苷可以通过调控炎症介质一氧化氮释放和促氧化因子同型半胱氨酸代谢，发挥减轻肺部炎症及肺组织损伤、促进炎症消退作用，其Arg1、Bhmt、Gnmt 等蛋白可能为柚皮苷抗肺部炎症作用的重要分子靶点。.(2)在气道上皮、平滑肌作用方面：柚皮素可以通过增加气道上皮细胞胞内cAMP浓度而激活CFTR通道开放，增加跨膜Cl-转运，同时恢复细胞受LPS及PM2.5刺激而降低的CFTR、AQP1、AQP5 mRNA及蛋白表达。此外，柚皮苷及柚皮素能够促进BKCa通道开放，引起K+内流，诱导细胞超极化，使得Ca2+浓度降低，抑制气道平滑肌收缩。.(3)在人体的代谢及排泄方面：柚皮苷在体内经Ⅱ相代谢反应可产生16种结合性代谢产物，其代谢存在种属及个体差异。.上述研究为阐释柚皮苷消炎、止咳化痰的科学内涵提供了实验依据。