柚皮苷对呼吸道浆液分泌的调控作用及机制研究

柚皮苷是我们从广东道地药材化橘红中提取的有效单体，具有显著的止咳化痰作用。我们已经彻底搞清楚柚皮苷的止咳作用机制：其止咳方式为外周性镇咳，止咳作用与抑制RARs放电有关。对于柚皮苷的化痰作用，我们已经研究了其对粘液分泌调控的机制。但是，化痰作用包括对粘液分泌调控和浆液分泌调控两个方面。柚皮苷对浆液分泌的调控作用及其机制，还是一个空白点。本课题正是针对这一问题而开展研究的。主要研究内容：(1)采用细胞模型，研究柚皮苷对呼吸道上皮细胞以及肺泡细胞膜表面CFTR与AQPs活性的调控作用；采用多种动物模型，研究柚皮苷对呼吸道浆液的调控作用。（2）采用CFTR基因敲除与突变的△F508CFTR、CFSMEo-、CFBE41o-型细胞，研究柚皮苷调控CFTR的作用机制；通过构建质粒并转导的方法，构建AQP5基因点突变的S156A和N185D表型的BEAS-2B细胞，研究柚皮苷调控AQP5的作用机制。

本课题阐明了柚皮苷的祛痰作用机制，并深入探讨了柚皮苷对烟熏诱导的慢性病理性咳嗽以及急、慢性呼吸道炎症模型的保护作用。结果如下：(1)在祛痰作用方面，柚皮苷对痰液中的粘液性成分与浆液性成分均具有调节作用。一方面，它能显著抑制 LPS 诱导的大鼠气道粘蛋白 MUC5AC 的合成与分泌以及气道上皮杯状细胞的增生；能显著抑制 EGF 诱导的 A549 与 NCI-H292 细胞粘蛋白高分泌；另一方面，它能通过活化气道上皮细胞基顶膜CFTR的表达与功能，促进Cl-分泌到气道腔，进而通过渗透压活化AQPs促进气道内浆液分泌。(2)在急、慢性呼吸道炎症抗炎作用方面，柚皮苷对LPS诱导的急性肺部炎症、CS暴露诱导的慢性气道炎症均具有很好的抑制作用。其抗炎作用一方面直接减少了诱发咳嗽与粘液分泌的刺激因子，另一方面，柚皮苷也具有直接抑制气道上皮在病理条件下杯状化生以及粘液高分泌。这能减少气道腔内粘液性成分的生成，进而维持气道腔内黏液性成分与浆液性成分的动态平衡，从而较好的发挥其祛痰作用。