针刺通过多巴胺抑制NLRP3炎性体调控COPD慢性炎症的机制研究

The therapeutic effect of acupuncture treating Chronic Obstructive Pulmonary Disease （COPD）is related to its inhibition of chronic inflammation, but mechanism of acupuncture regulating chronic inflammation of COPD is still unclear. Studies found that chronic inflammation of COPD is associated with the excessive activation of NLRP3 inflammasome. Recent study revealed that dopamine is an potential therapeutic target of NLRP3 inflammasome driven diseases, which indicates the possibility of inhibiting NLRP3 inflammasome to control COPD chronic inflammation. Acupuncture have recently been shown to lead to an increase of dopamine and inhibition of the release of inflammatory factor. Based on the above background, we assume that the mechanism of acupunture treating COPD is that acupunture may control chronic inflammation through regulating dopamine and inhibiting NLRP3 inflammasome. In this study, electroacupuncture at the ST36 Zusanli acupoints will be employed as intervention to observe the effect of acupuncture on pulmonary function, morphology of lung tissue, inflammatory factors, dopamine and NLRP3 inflammasome. Then this study will explore the role of acupuncture regulating dopamine and inhibiting NLRP3 inflammasome to control COPD chronic inflammation by selectively reducing dopamine andnorepinephrine production and inhibiting dopamine receptors. This project aims to partly explain the mechanism of acupuncture treating COPD in the aspect of neuroimmunology, and provide experimental evidence and theoretical basis for its clinical application.

针刺对COPD的治疗效应与其抑制慢性炎症反应相关，但针刺调控COPD慢性炎症的机制尚不清楚。研究发现COPD慢性炎症与NLRP3炎性体的过度激活相关。最近，研究显示多巴胺是NLRP3炎性体驱动的疾病的潜在治疗靶点，提示可能通过抑制NLRP3炎性体控制COPD慢性炎症。近来发现针刺的抗炎作用与针刺引起多巴胺分泌增多、抑制炎症因子的释放有关。基于上述背景，我们推测针刺治疗COPD的机制可能是通过多巴胺抑制NLRP3炎性体，从而调控COPD慢性炎症反应。本研究拟采用针刺足三里穴作为干预手段，选择性抑制多巴胺和去甲肾上腺素的产生、阻断多巴胺受体，观察针刺对COPD大鼠肺功能、肺组织形态学、炎症因子、多巴胺及NLRP3炎性体的影响，探讨针刺通过多巴胺抑制NLRP3炎性体调控COPD慢性炎症的作用。通过本项目，可望在神经-免疫学水平，部分阐明针刺治疗COPD的机制，为其临床应用提供实验依据和理论基础。

背景：慢性阻塞性肺疾病（Chronic obstructive pulmonary disease，COPD）在祖国医学中属于肺胀，治疗以宣肺健脾益肾为主。研究证实针刺足三里能减轻COPD患者症状，改善肺功能，提高生活质量。近年研究发现多巴胺参与针刺对炎症性疾病的调控，且多巴胺能抑制炎症反应过程中迷走神经引起的微血管渗漏从而改善COPD临床症状。所以我们推测针刺足三里对COPD炎症反应的调控与多巴胺有关。研究发现多巴胺在多种炎症反应过程中的抗炎效应主要通过与D1、D2受体结合实现。但多巴胺是否参与针刺足三里对COPD炎症反应的调控及其机制仍不明确。..目的：(1) 探索针刺足三里对COPD小鼠炎症反应的影响;（2）观察针刺足三里对血浆多巴胺水平的影响; (3) 探索多巴胺在针刺足三里调控COPD炎症反应中的参与机制。..方法：将 BALB/c小鼠适应性喂养1周，随机分组组。采用香烟烟雾鼻吸入法进行COPD造模，每天2次，每次75分钟，每周连续5天，共12周。空白组小鼠仅避光固定，不熏烟。从第11周起，针刺组在烟熏前进行双侧足三里穴位(ST-36)针刺，假针刺组进行非经非穴针刺，每日1次，每次30分钟。空白组及模型组小鼠仅采用相同装置固定，不针刺。末次烟熏结束后，麻醉小鼠并检测体重、肺功能，采集血浆、肺泡灌洗液、肺组织。对比各组体重，肺功能，肺组织匀浆、血浆、肺泡灌洗液IL-8、TNF-α、IL-1β水平，肺泡灌洗液细胞总数及分类细胞计数，肺组织炎症评分，肺泡平均线性截距，以及血浆多巴胺水平。..结果：（1）与空白组相比，模型组小鼠局部及全身炎症反应差异有统计学意义（P<0.05），提示造模成功；（2）与模型组相比，针刺组小鼠体重，肺功能，肺组织匀浆、血浆、肺泡灌洗液水平，肺泡灌洗液细胞总数及中性粒细胞数、巨噬细胞数、淋巴细胞数，肺组织病理评分差异有统计学意义（P<0.05），提示针刺能改善COPD小鼠局部及全身炎症反应；（3）氯丙秦阻断多巴胺效应及eticlopride hydrochloride阻断多巴胺D2受体后，小鼠局部及全身炎症反应较模型组相比无统计学差异（P>0.05），较针刺组相比无统计学差异（P<0.05），提示多巴胺及其D2受体参与针刺调控COPD炎症反应。