红褐色乌苏里貉毛色遗传规律与种质特性的研究

红褐色乌苏里貉是在家养条件下发生的一种毛色变异，本突变毛色比现饲养乌苏里貉具有更大的经济价值。本研究通过红褐色乌苏里貉互交、红褐色乌苏里貉与野生型毛色乌苏里貉及吉林白貉进行正反交杂交试验来研究红褐色乌苏里貉毛色遗传规律和与其它毛色的显隐性关系；利用现代动物育种学、细胞遗传学和分子生物学技术手段研究红褐色乌苏里貉的种质特性，对可能影响貉毛色的各种候选基因进行PCR扩增检测，并与其他动物的相关基因进行同源性比较，对可能造成红褐色貉毛色突变的原因进行查找及验证；明确红褐色乌苏里貉所特有的遗传特性，为红褐色乌苏里貉这一突变毛色在貉的育种及在貉皮生产中的应用提供理论依据。本研究对阐明貉毛色遗传和毛色突变的分子机制具有重要的科学意义。

本研究为探讨红褐色乌苏里貉的种质特性，测定了红褐色乌苏里貉、野生型乌苏里貉和吉林白貉的体重、体长、体温、呼吸频率和心率5项生理常数、18项血液生理指标以及19项血清生化指标。利用外周血淋巴细胞培养法制备染色体标本，分析了染色体核型。结果表明：红褐色乌苏里貉的体型较小；三种毛色貉的部分生理生化指标比较接近，但一些主要血液生理生化指标存在一定差异。红褐色乌苏里貉和野生型乌苏里貉的染色体众数相同，均为56；吉林白貉的染色体众数为56或57，其染色体数目存在多态现象。并进行了杂交试验，初步判断红褐色乌苏里貉的突变毛色是由两对等位基因互作引起的。另外，对红褐色乌苏里貉毛色基因MC1R基因、TYRP1基因以及KIT基因进行了相关研究，利用克隆测序技术得到了红褐色乌苏里貉和野生型乌苏里貉MC1R基因、TYRP1基因序列以及KIT基因第二外显子序列，并利用荧光定量技术分析了TYRP1基因在红褐色乌苏里貉和野生型乌苏里貉中的表达水平差异。结果得到长为276bp 的红褐色乌苏里貉KIT基因第二外显子序列，红褐色乌苏里貉MC1R基因序列长度为1329bp，与野生型乌苏里貉同源性达到99%，8处突变。红褐色乌苏里貉TYRP1基因CDS序列全长1614bp，包括完整的开放阅读框，共编码537个氨基酸。与野生型乌苏里貉序列完全相同。利用SPSS软件进行独立样本T检验，结果表明TYRP1基因在两种貉皮肤组织中均可稳定表达，利用F=(1+E)－△△Ct计算可知TYRP1基因在红褐色乌苏里貉中的表达量是野生型乌苏里貉的0.93倍，但差异不显著（p>0.05）。对貉进行微卫星遗传标记的筛选与鉴定，结果显示在微卫星富集文库的96个重组克隆中，有63个含有（AC）n微卫星DNA序列。其中，52个含有5个以上CA或TG重复序列，分别从5-24个不等。对48个个体进入了多态性分析，其中17个具有多态性。等位基因数目为2-8，所有位点均处于平衡状态。