TSE1基因在外周T细胞活化、分化及其介导的免疫应答过程中的功能研究

TSE1 is the T cell specific expressed novel gene found through data mining in ESTs database. We constructed TSE1-/- mice and proved that TSE1 plays an important role during the thymocyte development especially the positive selection. In this study, the function of TSE1 in peripheralna?ve T cells activation and differentiation including Th1, Th2, Th17 and iTreg subsets differentiations will be fully elucidated. We will also introduce different types of immunizations to study the in vivo function of TSE1 during different types of CD4+ T cells-mediated immune responses. Further, we will introduce the Listeria infection model to study the integrated function of TSE1 in different Th cells-mediated responses in vivo. The function of TSE1 in CD8+ CTL cell will be studied using LCMV infection model and the cytotoxic activity will also be detected both in vivo and in vitro. Finally, EAE and IBD disease models will be conducted to elucidate the contributions of TSE1 to the development of autoimmune diseases.

TSE1是本课题组通过EST数据库筛选出的免疫细胞特异性表达的新基因。在之前的青年基金课题中，我们成功制备了TSE1基因敲除小鼠，并证实TSE1在胸腺T细胞的阳性选择过程中发挥重要的作用。本课题将承接以上成果，继续研究TSE1在外周T细胞的活化、分化及其介导不同类型免疫反应过程中的功能。利用初始CD4+ T细胞体外定向分化，探讨TSE1在Th1、Th2、Th17及iTreg等功能亚群分化及其功能发挥中的作用，并结合体内不同类型免疫应答加以验证；通过LCMV病毒感染模型探讨TSE1在CD8+ CTL杀伤过程中的作用，检测相应的CTL杀伤指标；利用小鼠EAE和IBD自身免疫性疾病模型，探讨TSE1在自身免疫性疾病发生过程中的作用，揭示其细胞机制。本课题的完成将在原课题研究的胸腺T细胞发育基础上，进一步阐明TSE1在外周T细胞中的功能，为将TSE1作为临床诊断和治疗T细胞相关疾病的靶点奠定基础。

外周T细胞在免疫反应和维持机体免疫稳态过程中担当重要的角色，是机体抵御疾病感染、肿瘤形成的重要细胞亚群。T细胞功能包括CD8+ CTL细胞（cytotoxic T cell）直接杀伤病毒感染细胞或肿瘤细胞，对特异性抗原产生应答并分泌效应因子；CD4+ Th细胞（T helper cell）通过表面分子和分泌效应因子协助多种类型的免疫细胞共同发挥对机体的免疫保护功能，如辅助B细胞产生抗体介导体液免疫，增强巨噬细胞的免疫功能以促进机体对病原体的清除等。T细胞功能的异常往往会引起免疫系统的紊乱，导致机体无法在病原体感染或肿瘤细胞形成初期的病理状态下迅速恢复。在本课题的资助下，基于已有的研究基础，我们进一步对两个基因在外周T细胞的分化功能中的功能与作用机制开展研究，包括T细胞特异性表达基因TSE1基因和MINK1激酶基因。实验结果显示：TSE1在外周T细胞中的缺失并不影响Th1, Th2, Th17的体内分化，但是TSE1的缺陷会使CD4+T细胞在体外分化为Treg的能力受到影响。另一方面，我们对MINK1在Th17的分化中的功能机制开展深入的研究，发现MINK1通过影响Smad2-T324位点的磷酸化从而抑制TGF-beta信号通路，进而抑制体外及体内的Th17细胞分化。同时利用EAE小鼠模型显示MINK1缺失小鼠的发病程度明显升高。以上研究成果分别在不同层面揭示了外周T细胞稳态调控的分子机制，为进一步寻找到相关炎症性疾病的治疗靶点提供理论依据。