陷窝蛋白-1（Caveolin-1）与beta-连环蛋白（Catenin）/TCF信号途径对肝癌细胞核心岩藻糖基化的调控作用

人肝癌组织中α1-6岩藻糖基化及其合成酶岩藻糖基转移酶8（Fucosyltransferase， FUT 8）基因表达水平异常升高，但其机制不明。本研究将以高表达、不表达以及稳定转染表达陷窝蛋白（Caveolin-1）的小鼠肝癌Hca-F、Hepa1-6和Hepa1-6/cav-1细胞株和Cav-1基因敲除小鼠为研究对象，在体内、外观察Caveolin-1表达对肝癌细胞E-钙黏蛋白(E-Cadherin)表达和胞质β-连环蛋白（β-catenin）水平、对核内β-catenin/转录因子TCF复合物与Fut 8启动子的相互作用、对Fut8的表达及核心岩藻糖基化水平的影响，考证是否Caveolin-1通过活化β-catenin/TCF信号途径，调控肝癌细胞Fut8表达和核心岩藻糖基化水平，旨在揭示肝癌细胞核心岩藻糖基化的调控机制，为阐明肝癌的发生发展机制提供新思路。

岩藻糖基转移酶8（Fucosyltransferases 8，FUT8）又称核心岩藻糖基转移酶。参与细胞内信号通路、细胞增殖、侵袭转移、细胞间粘附、免疫应答等过程。已有研究表明，FUT8在肝癌等多种癌症中出现表达和活性异常增高，但其机制不明。Wnt信号通路在细胞增殖、分化、维持成体干细胞自我更新等生理过程发挥着重要作用。在肝癌、结肠癌等多种疾病中，大量病例同时出现Wnt/β-catenin信号通路过度激活和FUT8表达上调，而其分子机制尚未明确。生物信息预测表明，核心岩藻糖基转移酶（Fut8）启动子上游存在TCF/LEF结合序列，这提示：α1-6岩藻糖基化水平可能通过Wnt信号通路调控，Fut8基因可能是Wnt信号通路的靶基因。窖蛋白-1（caveolin-1，Cav-1）是胞膜窖的主要结构和功能成分，参与信号转导以及肿瘤转移的恶性行为。有证据显示，Cav-1 参与活化 Wnt/β-catenin信号通路，导致胞质内β-catenin的富集，随后进入核内通过β-catenin/TCF/LEF启动下游靶基因的表达。.本研究以Cav-1基因敲除以及野生型C57BL/6J小鼠为研究对象，通过小鼠肝癌模型的建立，在体内以及细胞水平探讨Cav-1是否通过Wnt/β-catenin调控Fut8基因的表达和α1-6岩藻糖基化水平，从而影响肝癌的恶性行为。.1..在小鼠整体水平上证明，Cav-1对体内糖基转移酶和糖基化具有调控作用； 在Cav-1基因敲除小鼠体内，糖基转移酶和糖基化水平下调；在化学诱导肝癌模型Cav-1基因敲除小鼠肝癌组织、血清中，Fut8和/或核心岩藻糖基化水平下降。提示：在肝癌发生中，相对核心岩藻糖基化水平升高，Cav-1基因表达升高是早期事件。.2..在细胞水平上证实：经典Wnt通路可以上调人肝癌细胞细胞中FUT8基因的转录活性；发现FUT8启动子序列中受经典Wnt通路调控的区域可能位于FUT8基因转录起始点上游的-1223bp~-396bp的范围内；过表达Caveolin-1可以上调FUT8基因的转录活性。.3..发现：过表达FUT8可以提高β-catenin的稳定性，激活Wnt/β-catenin信号途径，同时促进细胞增殖。这提示了FUT8在肝癌发生发展中的新功能。 .