炎症信号通路IL-6/STAT3/SOX4促进胆管癌细胞侵袭转移的机制

Cholangiocarcinoma (CCA) is a common biliary malignant tumor, and the incidence of which has been increasing by years. CCA is difficult to diagnose and cure, partly due to the unknown molecular mechanisms underlying the development of CCA. The research progresses have suggested that chronic inflammation plays important roles in the CCA pathogenesis and large numbers of inflammatory cytokines arise from the chronic inflammative reaction. We have recently revealed that miRNA clusters (miR-125b/miR-99a/Let-7a) can regulate cholangiocarcinoma progression and stem-like properties through the IL-6/ STAT3 pathway, leading to promote the transformation of cholangiocarcinoma cells. However, detailed molecular mechanisms how the inflammatory cytokines and the IL-6/ STAT3 control the initiation of cholangiocarcinoma stem cells are unclear. In this project, we endeavor to further focus on following studies:（1）the function of IL-6/ STAT3 in the process of stem formation and differentiation of cholangiocarcinoma cells.（2）the downstream pathways of IL-6/ STAT3 in cholangiocarcinoma stem cell differentiation and their regulatory mechanisms; The fulfills of the project would provide a novel drug target for the cholangiocarcinoma therapy.

胆管癌是常见胆道恶性肿瘤，因解剖位置特殊，确诊时多处疾病晚期。目前肝胆部位的炎症类疾病及胆结石、肝吸虫的感染和丙/乙型肝炎病毒导致的慢性炎症被认为是其发病的重要原因，炎症反应中存在大量炎症因子发挥重要作用。我们最近发表在Oncogene的研究首次发现胆管癌组织和正常胆管组织的miRNA簇（mir-125b/miR-99a/Let-7a）可通过对IL-6/STAT3的调控影响胆管癌细胞干性的形成和分化，影响其发生发展，但IL-6/STAT3等炎症因子如何影响胆管癌细胞的干性以及其下游通路尚未见报道。本项目拟在以上研究基础进一步探寻：（1）IL-6/STAT3在胆管癌中影响肿瘤细胞干性的下游通路及作用机制；（2）IL6/STAT3干性通 路对胆管癌细胞干性分化的调控机制，并在小鼠成体水平探讨IL6/STAT3炎症通路对胆管癌干性的调控作用。本项目开展将为胆管癌的靶向治疗提供新的药物靶点。

胆管癌是常见胆道恶性肿瘤，因解剖位置特殊，确诊时多处疾病晚期。目前肝胆部位的炎 症类疾病及胆结石、肝吸虫的感染和丙/乙型肝炎病毒导致的慢性炎症被认为是其发病的重要原因，炎症反应中存在大量炎症因子发挥重要作用。该项目重点开展了以下研究：（1）IL6/STAT3在胆管癌中影响肿瘤细胞干性的通路鉴定，为了阐明IL-6/STAT3等炎症通路调控胆管癌细胞的干性的分子机制，我们收集了38对胆管癌组织和癌旁组织的样品，采用全转录组测序，发现583 个lncRNA和3654 mRNA在胆管癌癌组织和癌旁样品中的表达具有显著的差异性。通过GO系统分析发现，很多lncRNA 和基因聚类于炎症通路和干性通路中，功能实验也同样显示，lncRNA/IL-6/STAT3炎症通路调控胆管癌细胞的微球形成能力；表明在胆管癌发生过程中，炎症通路直接参与干性通路进程以及细胞的转移侵袭能力；（2）我们还发现，许多m6A相关的基因在胆管癌样品中高表达，而且这些m6A核心基因，特别是METTL3和METTL14能够被IL-6/STAT3激活表达，而且STAT3直接结合在这些基因的启动子区域，提示IL-6/STAT3炎症通路可能通过调控m6A修饰在胆管癌干性维持中发挥着重要的功能;（3）进一步研究揭示了IL-6/STAT3炎症通路通过调控m6A修饰在胆管癌干性维持中发挥着重要作用。（4）我们进一步揭示了IL-6/STAT3通过m6A表观遗传修饰调控干性基因的普遍分子机制，在IL-6/STAT3调控通路中，METTL3复合体通过对mRNA 进行m6A修饰，从而调控这些干性基因的mRNA稳定性和翻译效率。项目实施阶段，在国际期刊发表论文4篇，主要完成人之一王文涛博士获得广东省（2020年度）杰出青年人才基金项目，对照项目合同书，本项目研究目标已达到，很好完成项目计划内容。