针刺对脑卒中肢体痉挛大鼠GABAA-BDNF-TrkB-突触可塑性蛋白信号通路的影响

To investigate the limb spasticity of cerebral stroke, change mechanism, and develop effective therapy, is a key problem needed to be solved. Research shows that stroke recovery and synaptic plasticity after limb function related to synaptic plasticity and BDNF-TrkB signaling, and the research group to clinical and animal study showed that the level of mechanism of acupuncture ease of limb spasticity in stroke and regulation of GABA receptor in the brain mRNA expression, thus put forward the hypothesis: the acupuncture treatment for stroke spasticity may be related to the regulation of brain GABAA-BDNF-TrkB- synaptic plasticity protein signal pathway. In the present study of limb spasticity in stroke model rats as subjects, the use of animal behavioral, electrophysiological and ultrastructural transmission electron microscopy, immunohistochemistry and fluorescence quantitative real-time PCR technique, expounds acupuncture relieve stroke from cellular and molecular level The mechanism of limb spasticity is by regulating the cerebral cortex, hippocampus GABAA-BDNF-TrkB- synaptic plasticity protein signal pathway, for acupuncture treatment of stroke spasticity clinical application to provide experimental basis.

探讨脑卒中肢体痉挛状态发生、变化机理，并开辟有效的疗法，是当前急需解决的关键问题。研究表明脑卒中后肢体功能的恢复与突触可塑性相关，突触可塑性与BDNF-TrkB 信号相关，而本课题组以往临床、动物研究结论显示针刺缓解脑卒中肢体痉挛状态的机理与调节脑内GABA受体的mRNA表达水平有关，因此提出假说：针刺治疗脑卒中肢体痉挛状态可能与调节脑内的“GABAA-BDNF-TrkB-突触可塑性蛋白”信号通路相关。本研究拟以脑卒中肢体痉挛状态大鼠模型为受试对象，运用动物神经行为学、电生理、超微透射电镜、免疫组化及荧光实时定量PCR技术方法，从细胞和分子水平阐述针刺缓解脑卒中肢体痉挛状态的作用机理，是通过调节大脑皮质、海马的GABAA-BDNF-TrkB-突触可塑性蛋白信号通路而实现的，为针刺治疗脑卒中肢体痉挛状态的临床推广应用提供实验依据。

项目的背景：脑卒中是严重危害人类健康的疾病，其患病率、致残率及死亡率较高。文献报道,我国卒中患者500万～600万,约70％～80％存在不同程度的残疾。脑卒中患者偏瘫是严重影响肢体功能恢复的重要原因，脑卒中后肢体痉挛状态是当前国内外医生感到棘手的难题，探讨其发生与变化机理，是当前脑卒中后康复治疗研究中急需解决的关键问题。.主要研究内容：通过MACO线栓法+内囊注射NMDA受体法建立以脑卒中肢体痉挛大鼠模型，应用Western Blotting、RT-PCR检测方法，以GABAa受体、GAT-1、SYN观察指标，探讨电针刺激曲池、阳陵泉对脑卒中肢体痉挛大鼠的影响机制的研究。.重要结果：.（1）内囊注射NMDA＋线栓法构建的脑卒中肢体痉挛的模型是成功的，相比课题组之前所造模型肌张力情况更加明显，但死亡率依然较高，预期后续在规范并造模手术操作后会明显提高。.（2）电针在病理组织学与血液生化指标上显示改善脑卒中肢体痉挛大鼠的神经损伤情况与肢体痉挛状况，具有一定的缓解作用。.（3）电针可以促进脑可塑性，在组织形态上促进突触的恢复，从而改善脑卒中肢体痉挛大鼠大脑的神经损伤情况与肢体痉挛状况。.（4）电针可以促进脑可塑性，在分子水平上调节脑可塑性相关因子释放，从而改善脑卒中肢体痉挛大鼠大脑的神经损伤情况与肢体痉挛状况。.关键数据及其科学意义：.该课题研究已发表论文18篇，获得国家实用新型专利授权11项，参加国际、国内学术会议5次，培养博士后1名、研究生5名，该课题负责人岳增辉教授2020晋升为二级教授、获2018年湖南省首届优秀研究生导师、2018年湖南省医学学科带头人。.本课题组从细胞和分子水平研究了针刺缓解脑卒中肢体痉挛状态的作用机理，是通过调节大脑皮质、海马的GABAA-BDNF-TrkB突触可塑性蛋白信号通路而实现的，探讨了脑卒中肢体痉挛状态的发生与变化的相关机理，为临床针刺缓解脑卒中肢体痉挛状态提供实验依据。