隔药饼灸调控TLR2/4- - IRF3/NF-KB信号通路稳定动脉粥样硬化易损斑块机制的研究

Atheresclerosis vulnerable atheroselerotic plaque (VAP) is the principal pathology base of acutecoronarysyndrome (ACS).How to promote the stability of AVP has becoming a world wide public health challenge.The study proved that Toll-like receptor (TLR) is a kind of transmembrane receptor that mediate innate immunity response also play a crucial role in the process of AS.TLR maybe the new target for AS to control and stabilize the VAP. This study using herbal-cake-separated-moxibustion treatment based on the past works. Use the rabbits with the VAP to be study subject, impress on Radioimmunoassay(RIA),immunohistochemistry, electron microscopic technique and fluorenscence quantitative PCR technology to discuess herbal-cake-separated-moxibustion stabilizing the VAP.By regulate the transmit of TLR2/4 IRF3 cholesterol reverse the signal pathways and TLR2/4-the NF-kappa B-inflammatory mediators variation signal pathways , This study try to analyze the mechanism of herbal-cake-separated-moxibustion stabilizing the VAP from celluar and molecular level.From this study a new clinical treatment for AS could have a experiment basis.

动脉粥样硬化易损斑块(VAP)，是导致急性冠状动脉综合征（ACS）发病的主要病理学基础，如何稳定易损斑块，一直是世界性公共卫生的重点和难题。研究证明Toll样受体(TLR)作为一种介导天然免疫反应的跨膜信号转导受体在动脉粥样硬化进程中的起着重要的作用，TLR可能是防治AS、稳定VAP的新靶点。本研究拟在课题组以往研究的基础上采用隔药饼灸，以动脉粥样硬化易损斑块模型兔为受试对象，运用放免检测、免疫组化技术、电镜技术和荧光定量PCR技术，探讨隔药饼灸稳定动脉粥样硬化易损斑块的作用机理，通过调控TLR2/4-IRF3-胆固醇逆转运信号通路及TLR2/4-NF-κB-炎性介质变化信号通路的传导，从细胞和分子水平阐明隔药饼灸稳定动脉粥样硬化易损斑块的作用机理，为今后临床开发防治AS的新方法提供实验依据。

动脉粥样硬化(AS)是动脉硬化的一种常见类型，急性冠状动脉综合征(ACS)主要是由于AS易损斑块(VAP)破裂和血栓形成造成急性冠脉完全或部分或闭塞所致。因此，斑块易损性已成为国内外研究的热点。斑块是否破裂取于斑块内在因素和外在因素的共同作用，而内在因素脂质（胆固醇等）的聚集及炎症反应是斑块不稳定性的决定因素。因此，深入研究斑块易损性的发生机制，增强易损斑块的稳定性，是预防急性心血管事件的重要方法。本研究拟在以往临床、动物研究工作的基础上采用隔药饼灸，以AS易损斑块模型兔为受试对象，运用放免检测、电镜技术、免疫组化技术和荧光定量PCR技术，从细胞和分子水平阐述隔药饼灸稳定AS易损斑块的作用机理，是通过调控TLR2/4—IRF3—胆固醇逆转运信号通路及TLR2/4—NF-κB—炎性介质变化信号通路的传导而实现的。将60只新西兰大耳兔，随机分为5组，即：A空白组；B模型组；C直接灸组；D隔药饼灸组；E药物组,每组12只。采用高脂饲养和腹主动脉球囊损伤损伤方法建立AS 易损斑块兔模型,分别给予不同组兔相同穴位直接灸、隔药饼灸、阿托伐他汀不同的治疗方法，连续治疗8周。观察隔药饼灸对兔AS易损斑块TLR2/4—NF-κB信号通路中相关炎性介质TLR2、TLR4、NF-κB含量的影响、TLR2/4-IRF3信号传导通路调控胆固醇逆转运的影响，对腹主动脉PI3K及AKT表达的影响。研究结果显示：1.隔药饼灸对血脂及脂蛋白代谢具有良好的调整作用。2.隔药饼灸能降低AS易损斑块兔内膜，抑制内膜增生，延缓AS的进一步发展。3. 隔药饼灸能良好改变AS易损斑块兔主动脉内皮细胞的损伤，保护内皮层，延缓AS的进一步发展。4.隔药饼灸能通过抑制兔动脉粥样硬化斑块中TLR2、TLR4、NF-κB活性及mRNA表达,起到稳定动脉粥样硬化斑块的作用。5.隔药饼灸能通过抑制兔AS易损斑块TLR2、TLR4、IRF3 mRNA表达,提高LXR、ABCA1抗原活性，起到稳定动AS易损斑块的作用。6.隔药饼灸能抑制腹主动脉AKT活性,抑制腹主动脉AKTmRNA表达,提示隔药饼灸是通过抑制AKT表达从而稳定VAP。该研究为今后临床开发防治AS的新方法提供了实验依据。