针刺对大鼠颈椎病模型髓核细胞FAK-MAPK信号通路影响机制研究

颈椎病的根本病理变化是椎间盘退变。本课题在复制大鼠颈椎病模型基础上，以细胞生物学、分子生物学、免疫为平台，通过针刺大椎穴进行干预，采用定量RT-PCR、Western Blot等技术手段，检测FAK、Paxillin、p130cas、Src、Crk、Grb2、Ras、MAPK等信号分子基因、蛋白的表达，深入研究大鼠颈椎间盘髓核细胞内FAK- MAPK信号转导，观察针刺在调控FAK- MAPK信号通路中的作用靶点、强度以及协同或拮抗效应，阐明针刺在介导该信号通路在延缓髓核细胞退变过程中的机理，为防治颈椎间盘退变性疾病提供更确切的方法。

摘要 目的：电针对颈椎病模型大鼠椎间盘细胞凋亡及FAK—MAPK信号通路的影响。方法：SPF级SD大鼠40只，采用完全随机化区组设计方案，将40只SD大鼠分成空白对照组（空白组）、模型对照组（模型组）、模型电针治疗组（模针组）、模型美洛昔康片对照治疗组（美洛昔康组），每组10只大鼠。建立动静力失衡性颈椎病模型，手术造模后饲养两个月。模针组取大椎穴进行电针针刺治疗，每次留针25 min，1次/天，14天为1个疗程，两疗程之间间隔2 d，共治疗2个疗程。美洛昔康组:给予美洛昔康片灌胃治疗两个疗程。空白组、模型组均只作固定而不做其它任何处理。采用HE染色和Toluidine blue染色观察颈椎椎间盘形态学的变化， TUNEL法检测椎间盘细胞阳性表达，PCR检测FAK、CRK、GRB2、RAS、RAF、ERK2等基因的表达，western blot检测FAK、CRK、GRB2、RAS、RAF、ERK2等蛋白的表达情况。结果：电针能降低椎间盘凋亡细胞的阳性表达，与模型组相比有显著差异。电针能显著提高FAK、CRK、GRB2、RAS、RAF、ERK2mRNA和蛋白的表达水平。结论：电针“大椎穴”能抑制颈椎病模型大鼠的凋亡细胞，其取效途径与电针激活FAK—MAPK信号通路有密切关系。