GSTp与iNOS结合而抑制LPS诱导的NO合成的机理研究

iNOS表达引起的NO的过量诱生是严重感染的共同通路。对iNOS蛋白的翻译后调控，特别是iNOS的二聚化和磷酸化等是治疗炎症性疾病策略的新关注点。GSTp对细胞维持氧化还原平衡十分重要。申请者发现GSTp蛋白对LPS引起的过度炎症反应具有明显的抑制作用，并能抑制细胞因子引起的细胞凋亡。申请者最近的工作结果表明GSTp可以与iNOS产生蛋白间的直接结合，并且抑制iNOS活性，减少LPS导致的NO过度合成。因此本项目拟对GSTp与iNOS结合而抑制iNOS活性的分子机制进行研究，主要研究内容为：1）分析GSTp与iNOS结合的结构域；2）研究GSTp对iNOS二聚化的影响；3）研究GSTp对iNOS磷酸化的影响；4）研究GSTp对iNOS的S-亚硝基化的调控。通过上述研究以明确GSTp通过调控iNOS的催化活性而抑制炎症发展的机理，为揭示GSTp的功能和炎症相关疾病的治疗提供新的实验证据。

我们已在细胞内通过 GSTp pull-down 实验证明了GSTp与iNOS蛋白复合物的存在。不仅通过质粒转染的基因过表达可形成细胞内二者的复合物，而且两者内源性的蛋白复合物也被免疫共沉淀所证明。同时，我们的研究表明GSTp抑制了 iNOS的二聚化，促进了iNOS的泛素化降解，抑制LPS刺激后iNOS的酶活，进而抑制了NO的合成和炎症反应的进程。相关的结果我们正在整理中，准备发表在国际免疫学相关刊物上。另外，我们的研究表明，GSTp 能够与胞内的重要转录因子stat3结合，抑制了Stat3的激活及入核，进而抑制了肿瘤细胞和血管平滑肌细胞的增殖，该研究对今后肿瘤及高血压等疾病的治疗有重要的借鉴意义，相关研究结果分别发表在Oncol Lett. 2013 Mar;5(3):1053-1057；Biochimica et Biophysica Acta 1843 (2014) 454–463