Pyk2信号通路在CCR7调控头颈鳞癌淋巴结转移中作用的研究

头颈鳞癌是头颈部最常见的恶性肿瘤，目前对其淋巴结转移的分子机制仍不完全清楚。课题申请人于2006年参与了一项国家自然科学基金的研究，证实了趋化因子受体CCR7能够通过PI3K/Akt、PLC/PKC、Rac、Cdc42等多个信号通路调节头颈鳞癌细胞的生长及转移。本项目将在此基础上深入研究，试图明确CCR7能否通过PI3K、PLC/PKC、RhoA及Src等分子将刺激信号传导到一个共同的中心环节Pyk2，以及Pyk2影响细胞骨架变化、调控细胞转移的作用蛋白。确定以Pyk2为中心环节的信号通路是否参与了CCR7自分泌信号环的构成，并从体内、外角度证明Pyk2信号通路在CCR7调控头颈鳞癌细胞生长和淋巴结转移中的作用。项目预期将揭示CCR7下游信号通路的中心环节及其作用机制。研究成果将完善CCR7对头颈鳞癌转移调控的机制研究，为临床上可能开展针对CCR7的基因靶向治疗提供科学依据。

头颈鳞癌是头颈部最常见的恶性肿瘤，早期即发生淋巴结转移是影响其预后的主要原因之一。因此如果能够阐明头颈鳞癌淋巴结转移的分子机制并对其进行适当干预的话，必将显著地提高头颈鳞癌的治疗效果。.在前期研究中，课题组发现，CCR7能够促进头颈鳞癌细胞侵袭和转移，pyk2似乎参与这一过程并构成重要的一个环节，具体作用机制及影响因素并不十分清楚，因此课题组对此进行深入的研究。.研究结果证实，在头颈鳞癌细胞中，CCR7能够增强pyk2的磷酸化，进而诱导F-actin聚集，抑制cofilin的磷酸化，从而调节肿瘤细胞的迁移和侵袭。种植稳定表达pyk2竞争性抑制分子PRNK的细胞后，裸鼠肿瘤成瘤率低，生长显著缓慢。.课题组在此基础上对pyk2的上游信号通路进行了研究。结果表明，RhoA/ROCK被CCR7激活，继而调节pyk2的磷酸化，从而影响cofilin活性，起到诱导头颈鳞癌转移的作用。MAPK家族中的ERK1/2及JNK虽然可以被CCR7激活，但它们并不参与pyk2活性的调节，它们直接通过E-cadherin和vimentin调节头颈鳞癌的转移。.课题组对pyk2的下游信号通路也进行了研究。CCR7激活的Src能够被pyk2抑制剂所阻断，证实Src是被CCR7通过pyk2激活。CCR7通过Src调节MMP-9和F-actin的活性，从而调节肿瘤细胞的运动能力。CCR7活化后，JAK2/STAT3磷酸化也增加， Src及pyk2阻断后，STAT3的磷酸化水平显著降低，提示Src及pyk2均是JAK2/STAT3的上游调节分子。JAK2/STAT3也通过E-cadherin发挥调节肿瘤细胞转移的能力。.总之，课题组对pyk2进行了深入的研究，初步描绘出其上下游信号通路及作用，在体内体外实验中均进行了证明。研究成果将为临床上针对CCR7及Pyk2的基因靶向治疗提供理论依据。