新疆哈萨克绵羊MHC包虫病抗性基因型个体MHC抗原作用虫体蛋白的筛选及抗性验证

绵羊细粒棘球蚴病（包虫病）是一种人畜共患病，有"次癌"之称，严重威胁着新疆畜牧业生产和农牧民的身体健康。前期研究表明，新疆哈萨克绵羊MHC-DRB、DQB的MvaIbc等基因型与包虫病抗性极显著关联，这种相关性还需要进一步验证。绵羊MHC基因型的抗性或易感性与MHC基因表达的MHC抗原与虫体抗原结合后递呈给淋巴细胞产生免疫反应的强弱、类型有关，研究抗性基因型与虫体抗原结合以及递呈给淋巴细胞的分子作用机制，对验证抗性基因型的抗性具有关键性的意义。本研究拟通过酵母双杂交和免疫共沉淀技术对新疆哈萨克绵羊MHC包虫病抗性基因型表达的MHC抗原与细粒棘球绦虫六钩蚴抗原相互作用蛋白的筛选和验证，并通过六钩蚴的虫体抗原重组蛋白免疫不同基因型绵羊，人工攻虫，检测抗性关联虫体抗原重组蛋白的免疫保护率，来进一步验证哈萨克绵羊MHC包虫病抗性基因型的抗性，为利用标记辅助选择选育绵羊抗病新品种提供理论依据。

绵羊细粒棘球蚴病（包虫病）是一种人畜共患病，有“次癌”之称，严重威胁着新疆畜牧业生产和农牧民的身体健康。前期研究表明，新疆哈萨克绵羊MHC-DRB、DQB的MvaIbc等基因型与包虫病抗性极显著关联。绵羊MHC基因型的抗性或易感性与MHC基因表达的MHC抗原与虫体抗原结合后递呈给淋巴细胞产生免疫反应的强弱、类型有关，研究抗性基因型与虫体抗原结合以及递呈给淋巴细胞的分子作用机制，对验证抗性基因型的抗性具有关键性的意义。本研究通过PCR-RFLP方法对250只哈萨克绵羊进行了相应抗性单倍型分析，共筛选出具有包虫病抗性的个体（基因单倍型为MHC-DRB1 MvaIbc-SacIIab-Hin1Iab）14只，非抗性个体（基因单倍型为MHC-DRB1 MvaIbb-SacIIaa-Hin1Iaa）22只。人工感染实验的14只绵羊每只饲喂约5000个成熟细粒棘球绦虫虫卵，建立人工感染细粒棘球绦虫模型。首先对哈萨克绵羊细粒棘球绦虫感染早期机体免疫应答的变化进行了检测，结果表明，携带MHC抗性基因型的绵羊表现出强的包虫病抵抗力，可能受其早期高水平的Th1细胞因子及IgE抗体的影响；利用SSH和基因芯片技术筛选出哈萨克绵羊感染早期小肠、肝脏差异表达基因，初步认为，杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR2DS1）、补体凝集素C8、丝氨酸蛋白酶抑制剂、生长抑制DNA损伤基因（GADD45B）、PLA2G2A 、IgM-VH、FTH1等基因为绵羊抵抗包虫病的候选基因；利用酵母双杂交和免疫共沉淀技术，筛选出3个与绵羊小肠MHC抗原蛋白相互作用的虫体蛋白；对绵羊包虫病B超跟踪研究表明，绵羊肝囊型包虫病的B超声像图分析可以参照WHO-IWGE（2003）提出的肝囊型包虫病B超声像图分型标准。该研究进一步验证哈萨克绵羊MHC包虫病抗性基因型的抗性，并为利用标记辅助选择选育绵羊抗病新品种提供理论依据。