核桃楸树皮新型抗肝癌单体及衍生物的构建和药靶细胞调节功能研究

本课题组已通过研究获得了两种抗肝癌细胞的核桃楸多酚化合物组分，前期研究也证实核桃楸树皮水及醇提物具有抑制肝癌细胞生长、促肝癌细胞凋亡及体外动物移植瘤抑制作用。因药物发挥抗肿瘤药效本质点归于对药靶细胞的调整和恢复，所以下一步工作重心是继续制备核桃楸树皮多酚抗肝癌单体，并根据药效修饰合成单体衍生物，揭示多酚单体及衍生物抗肝癌机理及是否在发挥药效本质时对于H22肝癌药靶细胞产生调节作用。基于此思路，本研究包括液/质谱仪联用及现代波谱手段分析、制备核桃楸树皮多酚抗肝癌单体和构建其衍生物。采用流式细胞术、荧光原位法、Western-blot、细胞免疫方法、肝癌动物移植瘤抑制实验对于多酚单体及衍生物作用机制进行研究。采用LSCM技术研究多酚单体及衍生物对H22药靶细胞GJIC、Cx蛋白、Ca2+及细胞间通讯调节作用。. 本项目充分利用核桃楸这一丰富民间资源，将对于药物研制和攻克肝癌类疾患作出贡献。

本课题组已通过研究获得了两种抗肝癌细胞的核桃楸多酚化合物组分，前期研究也证实核桃楸树皮水提物及醇提物具有抑制肝癌细胞生长、促肝癌细胞凋亡及体外动物移植瘤抑制作用。因药物发挥抗肿瘤药效本质点归于对药靶细胞的调整和恢复，所以下一步工作重心是继续制备核桃楸树皮抗肝癌单体成分，揭示单体成分及衍生物抗肝癌机理及是否在发挥药效本质时对于肝癌药靶细胞产生调节作用。.基于此思路，本研究包括核磁共振技术及现代波谱手段分析、制备核桃楸树皮抗肝癌单体。采用流式细胞术、荧光染色法、免疫细胞化学法、肝癌动物移植瘤抑制实验对于核桃楸单体及衍生物作用机制进行研究。采用Q-PCR、Western-blot、Confocal技术研究核桃楸单体及衍生物对肝癌药靶细胞NF-kB，Bcl-2，BAD，AKT、JNK等一系列蛋白信号因子及细胞间通讯调节作用，并通过电镜法、Western-blot等方法深入揭示其在诱肿瘤细胞增殖抑制中的生物学行为和分子机制，目的揭示药物发挥抑瘤的最本质点，借信号通路的调节最大限度发挥和调控抑瘤的最佳药效。本项目充分利用核桃楸这一丰富民间资源，将对于药物研制和攻克肝癌类疾患作出贡献。.本项目预定的研究内容完成情况良好。就其研究方案包括1）核桃楸树皮单体成分的制备、分离、鉴定；2）核桃楸树皮单体成分抗肝癌药效及分子机理研究；3）核桃楸树皮单体成分药靶细胞调节功能研究；4）核桃楸树皮单体成分对裸鼠肝癌模型肿瘤生长治疗作用和免疫作用的研究。所有四部分研究内容均按原定设计依次进行并已实施完成。本项目由细胞水平、分子水平、动物水平采用一系列先进手段对于核桃楸树皮抗肝癌作用机理进行全面而深入的探讨，为核桃楸树皮应用于临床前试验性治疗肝癌提供最基础、最准确的依据。本项目筛选到了较好的核桃楸树皮抗肝癌单体及衍生物，揭示了核桃楸树皮单体成分抗肝癌药效、促凋亡和自噬生物学行为及分子机制，以及药物在发挥药效本质时对于细胞信号通路药靶产生的调控作用，这对于进一步实现其抗肝癌天然药品和衍生药品的研发具有重要意义。另外，本项目更深层次地揭示了在肿瘤、药物及宿主三方面因素影响下，如何调节核桃楸抗癌生物学行为及其药靶分子，才能更有效地发挥核桃楸这一天然植物资源在恶性肿瘤防治方面的积极作用。.本项目研究成果显著，已发表相关论文数篇，其中SCI论文1篇，中文核心论文3篇，获得授权发明型专利1项，培养研究生8名。