家族性远端关节弯曲畸形新致病基因的识别与功能研究

远端关节弯曲(distal arthrogryposis DA)是严重危害人类运动系统的先天畸形之一，呈常染色体显性遗传,主要表现为手足挛缩畸形及骨骼肌力量减弱。临床上根据严重程度和累及部位将其分为9个亚型，约2/3家系还没有发现致病基因位点。DA1是最常见的基础亚型，美国人群发病率大约为1/万，但仅在极少数家系发现原肌凝蛋白亚单位2（Tropomysin2,TPM2）基因突变，因此一定还有新的DA1致病基因存在。我室2009年为止完成了两个DA2B大家系的基因定位、突变检测、产前基因诊断和小鼠的突变基因模型构建工作。目前正在对两个DA1家系进行基因定位，382个遗传标记位点连锁分析发现1个大约56.5厘摩(cM)候选区域：10q22.1-10q25.1与致病基因存在紧密连锁关系。拟在前期工作基础上进行基因精细定位、克隆、鉴定和初步功能研究。为阐明DA1的发病机制和出生缺陷干预打下基础。

远端关节弯曲(distal arthrogryposis，DA)是一类以手足挛缩为主要表现特征的非神经的运动系统疾病，四肢功能受累，同时伴有骨骼肌力量减弱，面部肌肉发育不良等症状，严重者累及近端关节和心肌。据估计在美国单纯性先天肢体挛缩畸形在新生儿中发病率为1/200~500，多发挛缩畸形在人群发病率大约1/3000。临床上根据严重程度和累及部位将其分为10个亚型，DA1及最常见的基础亚型，DA2除了手足挛缩要比DA1严重外，还有非常典型的面部特征。至2003第一例DA致病基因突变被报道以来，目前有6种致病基因被发现报道，它们均编码肌丝结构蛋白和功能亚单位。目前，就所发现的DA致病基因均存在不同的剪接体，在各个不同的组织器官中均有表达，但是在不同的胚胎发育期表达不同。但是绝大多数DA患者的手足弯曲在胚胎期在24周以后才会表现出来。虽然推测DA的表型是由于突变基因改变了对Ca2+的敏感程度，导致肌肉过度挛缩所引起，但是并没有直接实验证据来证明。研究最早的DA致病基因模型是在2001年，TPM2的DA致病性得益于果蝇TNN-TPM-Actin复合物突变模型，其翅膀拍打功能减弱，翅翼外展受限等。2013年在MYBPC1敲减斑马鱼中发现：其身体弯曲度增加，运动活性减弱，有心脏水肿等。.我们于2003年开始DA疾病研究，是第二个报道DA突变的实验室。2008年得到辽宁省自然科学基金资助，将2个DA家系基因初步定位。并且与相关单位合作进行了TNNI2转基因小鼠动物模型的前期研究。2010年得到国家自然科学基金资助。该研究目的在于定位、寻找、确认DA致病基因，发现中国人群的DA表型特征，临床应用,初步研究致病基因功能。.由于此项目是我们单位唯一得到国家自然科学基金支持的课题，得到了单位的全力支持，没有收任何管理和动力费用，资金全部用于了科研。进行了10个DA家系的致病基因研究，定位3个家系，发现2个新区域，1个正在扫描中；一共发现6个DA家系的致病基因及突变；产前基因诊断1例，回访已经生育正常孩子；在致病基因TNNI2、TNNT3的胚胎组织表达研究中，发现了新的TNNT3基因cDNA序列改变；发表4篇SCI文章，3篇在投。我们超额完成了预期2个DA家系的新基因的识别及功能研究。下一步我们会继续寻找新的致病基因，并对其致病机制进一步研究。