免疫纳米载体靶向介导saRNA激活KLF4抗前列腺癌实验研究

激素难治性前列腺癌（CaP）的治疗是临床一个棘手问题，靶向生物治疗有望成为新的治疗模式。RNA基因转录激活技术（RNAa）通过小RNA分子（saRNA）激活具有肿瘤生长和转移的抑癌基因KLF4达到抗CaP目的。本项目旨在前期研究双价单链抗体（TfR-bsFv）的基础上，拟采用新的免疫纳米载体系统携带目的基因靶向前列腺癌实验研究。通过生物信息学优化ScFv碱基密码，设计构建携带阴性寡肽尾的TfR-bsFv，以此作为靶向分子，进一步构建新型免疫纳米载体系统，靶向导入KLF4-saRNA介导CaP细胞凋亡与抑制其增殖，拟通过体外（前列腺癌PC3细胞培养）和体内（荷瘤鼠和CaP转移模型）实验，探讨新型载体系统的靶向基因表达与KLF4激活产生的生物学效应（抑制前列腺癌生长、侵袭、转移）及其作用机制，为该免疫纳米载体抗CaP实验研究提供理论依据和实验基础，从而为前列腺癌分子靶向治疗探索新的策略。

前列腺癌的发病率和死亡率逐年增高，已成为威胁老年男性最常见的恶性肿瘤之一，其中去势抵抗性前列腺癌已成为前列癌治疗的热点。小RNA技术是基因治疗中调控基因表达最常用的手段之一，其中RNA激活（RNAactivation,RNAa）适合应用于前列腺癌的基因治疗。而目的基因靶向安全导入与高效表达，以及外源基因能否选择性的转运至靶组织并进入靶细胞内并稳定表达，仍是肿瘤基因治疗最关注的问题。本研究通过制备新的免疫靶向载体系统携带激活RNA进行目的基因靶向治疗前列腺癌实验研究，为前列腺癌的治疗提供新的途径和策略。本研究成功构建TfRscFv-GAL4融合蛋白作为靶向分子，验证了其体外生物学活性，为进一步将其应用于肿瘤靶向治疗奠定实验基础；体外实验证实小分子激活RNA（KLA4-saRNA）促进抑癌基因KLF4在转录水平发挥抗肿瘤作用，成功构建pENTR™/U6-saKLF4-CMV-EGFP表达载体，并在前列腺癌细胞中激活KLF4基因，为saRNA激活抑癌基因治疗前列腺癌提供了有效策略。目前，课题组已发表SCI论文3篇（BMC Biotechnology，Prostate Cancer Prostatic Dis，Mol Med Rep）。