miR-373调节RASSF1A基因表达的实验研究

申请者在前期研究中发现抑癌基因RASSF1A异常甲基化对NSCLC具有一定的诊断及术后疗效预测价值，但其调控机制尚不明确。本课题拟在前期研究的基础上对NSCLC细胞株和正常肺细胞株，对miR-373、MBPs和RASSF1A表达检测，并分析它们之间的关系，同时对过量表达miR-373的转染细胞系进行MBPs和RASSF1A指标检测。探索miR-373能否通过负向调控MBPs表达，从而影响RASSF1A的表达。本研究的完成将有助于了解miR-373在NSCLC的发生发展中的可能作用，并为miR-373作为分子靶标进行肿瘤治疗提供理论依据。同时也进一步揭示肿瘤的发生、发展过程中，表观遗传学中MicroRNA与DNA甲基化相互调节发挥的重要作用。

.本课题研究miR-373在NSCLC发生发展过程中的可能作用，选择5株正常及肺癌细胞株，对其miR-373表达进行检测，研究结果发现肺部正常细胞株和肺癌细胞株的miR-373均不表达，miR-373可能并不参与肺癌的发生发展过程，因此并未进行后续研究。本课题改为选择研究miR-27a在肺癌发生发展中的应用价值，通过研究miR-27a在顺铂（DDP）体外诱导人肺腺癌细胞株SPC-A1凋亡中的表达变化，分析其与细胞凋亡之间的相关性，研究结果发现miR-27a在顺铂(DDP)体外诱导人肺腺癌细胞株SPC-A1凋亡过程中表达升高，提示其可能参与肺癌细胞凋亡调控。本课题同时miR-27a在肺腺癌患者疗效监测和预后评判中的应用价值，跟踪监测晚期肺癌患者化疗过程中血清miR-27a相对含量的变化，研究结果提示每周期化疗用药 3~5 d后的血清miR-27a水平可反映肺癌患者对当前化疗药物的敏感性，具有较高的敏感度，血清miR-27a定量检测可作为有效的短期疗效考察指标，可应用于肺癌患者个体化治疗中。. 同时，对早期肺癌患者的肺部穿刺组织、血清和血浆标本进行RASSF1A和APC基因甲基化定量检测，研究结果显示血清RASSF1A和APC基因甲基化联合诊断显著优于传统肺癌血清学指标，对早期肺癌诊断具有一定的价值。