miR-373促乳腺癌侵袭转移的靶标基因发现及其作用机制研究

前期研究表明，miR-373具有促使乳腺癌细胞侵袭转移的功能。为了发现其调控的靶标基因，阐明其促肿瘤侵袭转移的分子机制，我们采用SILAC定量标记技术结合蛋白质组学高通量策略筛选获得一个新的miR-373可能靶标基因RECK。.本项目是在此新发现的基础上，通过构建RECK基因mRNA的3'UTR荧光报告基因，证实RECK 是miR-373 的靶标基因；通过体外侵袭转移模型和动物实验，阐明miR-373通过抑制RECK基因表达促使肿瘤侵袭转移的分子机制；最后在临床样品中获得miR-373通过抑制靶标基因RECK表达促使乳腺癌侵袭转移的证据。从而证实RECK是miR-373 的一个新靶标基因，阐明miR-373促使乳腺癌侵袭转移的分子机制。有助于我们深入理解miR-373促肿瘤侵袭转移的功能，和从miRNA这个新的角度来理解肿瘤发生侵袭转移的机制，拓展对肿瘤侵袭转移机制的认识。

在此国家自然科学基金的资助下，我们圆满超额完成了计划书原计划的研究内容和研究目标。我们在不同转移能力的乳腺癌细胞和组织中，miR-373表达水平存在差异，相对于低转移的乳腺癌，高转移的乳腺癌中miR-373表达水平升高。miR-373过表达促使乳腺癌侵袭转移和EMT的发生，抑制miR-373的下调肿瘤细胞的侵袭转移能力。我们进一步采用SILAC定量蛋白质组学技术鉴定了335个受miR-373调节的蛋白质分子，其中192个下调的蛋白质分子是潜在的miR-373的靶标基因。经过生物信息学分析，发现了包括TXNIP在内的27个miR-373的候选靶标基因。发现miR-373主要是通过翻译后抑制途径抑制靶标基因的表达，而不是导致靶标基因mRNA降解。证实TXNIP的表达水平与miR-373的表达水平负相关，证实TXNIP是miR-373的一个新靶标基因。证实TXNIP是一个肿瘤转移抑制基因,从动物水平和细胞模型证实miR-373主要通过抑制TXNIP的表达促使乳腺癌的侵袭转移和EMT的发生。在本项目的资助下，已经发表SCI论文5篇，参加国际、国内肿瘤相关学术会议8次，培养硕士研究生3名。