蛋白质非天然氨基酸的引入及PEG定点修饰的研究

本课题针对PEG修饰研究中的难点问题- - PEG定点修饰研究，以尿酸酶为研究对象，开展借助于非天然氨基酸的PEG定点修饰研究。利用詹式甲烷球菌属酪氨酰tRNA合成酶/酪氨酰tRNA系统（tyrosyl-tRNA synthetase / tRNA pair），在尿酸酶非活性位点处定点引入非天然氨基酸- - 对叠氮基苯丙氨酸。同时制备含有炔基的PEG修饰剂，使其专一性地与尿酸酶上的叠氮基团进行偶联反应，达到定点修饰的目的。获得具有天然活性、结构均一的PEG化尿酸酶，建立蛋白质非天然氨基酸引入和PEG定点修饰的技术体系。同时，完成PEG化尿酸酶的性质、结构、生物活性比较研究。本项目的成功完成不仅为PEG化尿酸酶作为新药研究打下基础，更主要的是为蛋白质的分子修饰研究（特别是PEG化研究）提供新思路和有效方法，对促进基因工程蛋白质类药物的改性研究具有重要意义。