Lin28/miR-107通路在胃癌化疗耐药中的作用及机制研究

Lin28作为重要干细胞标记，具有诱导多能干细胞形成、抑制miRNA如miR-107等加工成熟的功能。前期研究我们发现将lin28导入胃癌细胞后，miR-107 miRNA的表达明显下降，同时胃癌细胞对化疗的敏感性也降低，因此，我们推测lin28/miR-107参与胃癌化疗耐药。在此基础上，我们将：1）细胞水平进一步研究lin28和/或miR-107上调或敲低后胃癌细胞化疗敏感性的变化，并通过研究miR-107靶基因的变化初步探讨lin28/miR-107参与胃癌化疗耐药的机制；2）通过构建移植瘤模型体内研究lin28/miR-107对胃癌化疗疗效的影响及耐药相关miR-107靶基因的变化；3）探讨胃癌新辅助化疗前后标本lin28、miR-107及相关靶基因表达与胃癌化疗疗效的关系。通过本课题，以期明确Lin28/miR-107在胃癌化疗耐药中的作用及机制，为逆转胃癌化疗耐药提供新的靶点。

我们的前期研究发现lin28转染胃癌细胞MKN-45后，miR-107的表达水平明显下降，同时胃癌细胞对紫杉醇及顺铂的化疗敏感性也下降，我们推测lin28/miR-107途径可能参与胃癌的化疗耐药，本课题将在细胞水平、动物模型及临床病理标本基础上进一步明确lin28/miR-107信号通路在胃癌化疗耐药中的作用。我们的研究结果为：1）细胞水平我们发现lin28高表达的胃癌细胞株MKN-45/lin28对奥沙利铂，紫杉醇等药物的敏感性下降，运用si-lin28敲低lin28表达后MKN45/lin28对化疗药物的敏感性复又增加，同时发现lin28表达变化影响miR-107的表达水平，进一步通过改变miR-107表达发现胃癌细胞对化疗药物的敏感性也随之变化，同时lin28表达也随之改变。对miR-107下游基因的研究发现，Lin28引起胃癌细胞化疗敏感性降低可能与miR-107表达改变后上调靶基因C-myc，MDR1 / P-gp的表达，并下调CyclinD1的表达相关。2）动物实验通过构建lin28稳定转染的MKN-45细胞，空质粒转染细胞、母代细胞移植瘤模型，顺铂腹腔化疗后发现lin28高表达移植瘤小鼠肿瘤生长明显快于母代细胞移植瘤小鼠， lin28高表达移植瘤体积明显大于母代细胞移植瘤。移植瘤组织QPCR检测miR-107得到与细胞实验相同结果。3）临床标本研究lin28/miR-107通路与胃癌临床化疗疗效的关系，发现Lin28表达高的患者病理下化疗反应差，而Lin28表达低的患者其化疗反应相对较好，表明lin28表达与胃癌的化疗疗效相关，同时发现化疗前后miR-107的变化、下游蛋白MDR1 / P-gp表达与胃癌新辅助化疗疗效相关。通过本课题研究，明确了lin28在胃癌化疗耐药中的作用，并且发现lin28/miR-107信号通路参与胃癌细胞化疗耐药，lin28通过调控miR-107影响MDR1 / P-gp等蛋白的表达可能是影响胃癌化疗耐药的一个途径，本课题提供了引起胃癌化疗耐药的新的相关因素，提出了具有干细胞标记的lin28在胃癌化疗耐药中具有重要作用。