长链非编码RNA MEG3抑制NSCLC顺铂耐药机制研究

The molecular mechanism of non-small cell lung cancer development and cisplatin resistance are still the focus and difficulty in the present. Recent studies have shown that lncRNAs play a pivotal role in drug resistance. In our previous study, we have found that compared to the parental cell A549, the expression of lncRNA MEG3 was significantly decreased in A549/CDDP cell.Then we verified it in tumor tissues of advanced NSCLC patients. Over-expression of MEG3 could significantly increase cisplatin sensitivity, and the expression of MDR1 was down. Recent studies have shown that lncRNAs bind to PRC2 complex to guide them to specific locations in the genome, suppress the function of target gene. We found an increased expression of MDR1 after interferring the core subunitof PRC2(EZH2). So, we hypothesize that lncRNA MEG3 can bind to PRC2 complex and suppress the expression of MDR1, reducing cisplatin resistance. We will verify our hypothesis by using RIP-Sequencing、ChIP et.al methods. Our study could contribute to enrich the research of molecular mechanism of NSCLC development and cisplatin resistance, and would provide new strategies for NSCLC therapies.

顺铂耐药的分子机制及临床应对策略已是目前非小细胞肺癌（NSCLC）治疗亟待解决的问题。新近研究表明lncRNA在肿瘤耐药形成过程中起重要作用。本课题组前期通过芯片发现NSCLC耐药细胞株相比亲本细胞株lncRNA MEG3表达显著下调，并在晚期NSCLC组织标本中得到验证；过表达MEG3能增加顺铂药物的敏感性，并下调多药耐药基因MDR1的表达。文献报道lncRNA可募集绑定PRC2复合体抑制靶基因的表达。本课题组通过干扰PRC2核心亚基EZH2后，发现MDR1表达上调。据此提出假设：在NSCLC中MEG3募集绑定 PRC2复合体，促进MDR1基因启动子区H3K27三甲基化位点活性增高，抑制MDR1的表达，从而降低顺铂耐药性。本课题组将通过临床样本验证，运用RIP、ChIP等技术证实上述假设，丰富NSCLC顺铂耐药分子机制的认知，为逆转临床治疗中NSCLC顺铂耐药提供实验依据。

肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，在中国其发病率和死亡率均位居所有肿瘤之首。非小细胞肺癌（NSCLC）约占全部肺癌诊断病例的75%。顺铂是NSCLC化疗方案的基石，但是临床上由于肿瘤细胞原发性或继发性耐药，导致治疗失败，给治疗带来极大的困扰。因此，顺铂耐药的分子机制及临床应对策略已是目前非小细胞肺癌（NSCLC）治疗亟待解决的问题。新近研究表明lncRNA 在肿瘤耐药形成过程中起重要作用。本项目旨在通过芯片技术筛选与NSCLC顺铂耐药密切相关的lncRNA，并研究这些lncRNA在 NSCLC顺铂耐药密中的作用和可能的分子机制。课题组通过lncRNA芯片分析发现NSCLC 耐药细胞株A549/CDDP相比亲本A549细胞株 MEG3 表达显著下调。A549/CDDP细胞中过表达MEG3 能增加细胞对顺铂药物的敏感性，抑制细胞增殖和顺铂诱导的细胞凋亡。同时，动物实验证实，过表达MEG3能显著增 A549/CDD 细胞对顺铂药物的敏感性，进而抑制瘤体的生长。机制研究表明，MEG3 通过抑制MDM2蛋白的表达，进而拮抗其对肿瘤抑制基因P53的降解，导致P53蛋白的表达上调发挥抑癌基因的作用。我们进一步在41例顺铂药物治疗的NSCLC 病人组织中检测MEG3的表达，结果显示MEG3低表达组的病人对顺铂药物的敏感性显著低于MEG3表达高组的病人，并且MEG3低表达组病人的进展生存期时间较MEG3表达高组病人明显缩短。本项目的研究结果表明，lncRNA的紊乱表达在NSCLC顺铂耐药中发挥着重要的作用，其中MEG3的表达下调参与NSCLC顺铂耐药的形成，可作为未来逆转NSCLC顺铂耐药的潜在的分子靶标。