FAPα在成纤维细胞维持骨髓瘤细胞生长生存中的作用及其机制研究

多发性骨髓瘤（MM）是起源于B细胞系的恶性血液系统疾病，骨髓基质细胞（BMSCs）在MM的疾病发生发展中具有重要意义，其中成纤维细胞（Fb）是其主要细胞成份，FAPα是特异性表达于肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）的一种蛋白酶，也广泛表达于MM BMSCs。近年来，CAFs及FAPα作为适用于肿瘤靶向治疗的靶标正倍受关注。本课题以我们在MM骨髓巨噬细胞研究的基础上，采用ELISA、PCR、Western-blot及siRNA等研究方法，试图解析MM骨髓Fb的表型和功能特征；研究Fb对MM细胞生长及化疗药物诱导MM细胞凋亡的影响；探索在MM骨髓Fb作用下，MM细胞内信号传递、转录因子和多种相关基因表达的改变；研究FAPα在MM细胞与Fb相互关系中的可能关键作用。旨在阐明MM骨髓Fb及FAPα在MM疾病病理机制中的作用，为MM的有效治疗提供新的靶点，为进一步设计新的靶向治疗策略提供实验依据。

成纤维细胞是肿瘤基质中的主要细胞成份之一，又称为肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）。也是骨髓基质细胞（BMSCs）的主要成份之一，在多发性骨髓瘤（MM）疾病发生发展中具有重要意义。有文献认为，CAFs的很多特性与骨髓间充干细胞（BMMSCs）一致，我们的研究也发现，BMMSCs同样高表达CAFs的主要表面蛋白成纤维细胞活化蛋白α（FAPα），称之为MSCs/CAFs。.本项目在蛋白和mRNA水平检查初发或复发MM患者骨髓单个核细胞FAPα表达，发现其表达量高于健康志愿者，但无统计学意义；进一步研究发现FAPα表达于BMSCs，而不表达于肿瘤细胞。体外培养条件下，在MM条件培养基（TCCM）持续作用下，MM患者及健康供者MSCs/CAFs FAPα表达均明显上升；提示在肿瘤的环境中，骨髓来源的MSC有FAPα的表达上调。.经TCCM处理的MSCs/CAFs与MM细胞株共培养，发现MSCs/CAFs 能够保护MM细胞抵抗硼替佐米诱导的细胞凋亡，但当用Tanswell将两种细胞隔开，使之不能相互接触，但可溶性细胞因子能够通过，则保护作用丧失，提示这种保护作用必须有细胞间相互接触；Si-RNA干扰FAPα在MSCs/CAFs 中的表达，发现这种保护作用明显下降，提示FAPα在MSCs/CAFs 保护MM细胞抵抗硼替佐米诱导的细胞凋亡中起到重要的作用。.进一步的研究表明，FAPα在MSCs/CAFs 保护MM细胞抵抗硼替佐米诱导的细胞凋亡时，有细胞内β-catenin激活及其下游靶蛋白，包括c-myc, survivin, cyclin D1表达显著上升；采用Si-RNA干扰FAPα在MSCs/CAFs 中的表达，不能激活β-catenin通路。考虑FAPα可能通过β-catenin途径参与MSCs/CAFs 对MM细胞的抗凋亡保护作用。