Deltex1基因单体型与乙肝疫苗接种后免疫应答差异性的关联研究

乙肝疫苗接种后无或弱应答常导致接种预期失败，其发生机制远未阐明，而这种现象与免疫系统遗传背景的关系已成为新的研究热点。目前研究多集中于与T细胞活化、启动相关的细胞因子(如：HLA、TNF、IFN、IL-1，4，10等)，而缺乏与T细胞静默相关的遗传差异性研究。Dtx1在T细胞静默机制中发挥重要作用，是免疫应答启动与否的关键分子，我们前期研究发现： Dtx1水平与乙肝疫苗接种后免疫应答水平呈明显的负相关，基因多态性很可能通过影响Dtx1的表达，从而导致接种后免疫应答水平的差异。因此我们从Dtx1的基因多态性分析入手，通过构建基因连锁不平衡单倍域，利用高通量Pyrosequencing定量遗传分析系统，寻找标签SNP及单倍型，同时基于本课题组前期开发的电导型免疫传感器开展疫苗接种后个体临床表型的检测，以明确功能性SNP位点的意义，以期揭示乙肝疫苗接种后免疫应答差异现象的发生机制。

乙肝疫苗接种后无或弱应答常导致接种预期失败，其发生机制远未阐明，而这种现象与免疫系统遗传背景的关系已成为研究热点。以往的研究多集中于与T细胞活化、启动相关的细胞因子(如：HLA、TNF、IFN、IL-1，4，10等)，而缺乏与T细胞静默相关的遗传差异性研究。Dtx1在T细胞静默机制中发挥重要作用，是免疫应答启动与否的关键分子，我们前期研究发现： Dtx1水平与乙肝疫苗接种后免疫应答水平呈明显的负相关，基因多态性很可能通过影响Dtx1的表达，从而导致乙肝疫苗接种后个体免疫应答水平的差异。我们利用HapMap数据库，从Dtx1的基因多态性分析入手，开展基于Dtx1全基因具有代表性的标签SNP位点的筛选，构建其单体型。利用生物信息学方法初步筛选出24个位点和10个标签SNP。采集全程接种乙肝疫苗的幼儿的血液标本800余例，利用iMLDR方法对19个SNP位点进行基因分型，观察Dtx1标签SNP位点及其单体型与临床表型（乙肝疫苗免疫应答反应强弱）的关系，通过高通量测序证实rs2384077\rs10744794两个位点存在明显差异。通过检测Dtx1的表达水平与基因型的关系证实rs2384077\rs10744794的差异性存在。利用报告基因系统，将含有/不含有rs2384077\rs10744794的质粒进行细胞转染,也明显影响Dtx1的活性，进一步确定其有重要临床意义。本实验在国内外首次报道Dtx1与乙肝疫苗免疫应答反应差异性之间的关系，证实下调Dtx1的表达水平可以有效逆转乙肝疫苗接种后免疫应答的不足。实验为解决人群中接种乙肝疫苗后无或弱应答的现象探索出一条新的解决思路，即接种乙肝疫苗时联合下调Dtx1的表达可能会实现这类人群的乙肝疫苗接种预期，增强其对乙肝病毒的抵抗力。