RACK1表达下调/缺失在结肠癌发病中的作用及其机制研究

我们前期采用蛋白质组学技术筛选与结肠癌发生有关的结肠上皮衰老相关蛋白质，结果发现：活化蛋白激酶C受体-1(RACKl)表达下调/缺失与结肠癌发病密切相关。为揭示RACKl表达下调/缺失在结肠癌发病中的作用及其机制，项目首先建立RACKl表达上调的结肠癌细胞系和RACKl表达下调的正常结肠细胞系；再以建立的细胞系为样本，分析RACK1表达改变对结肠癌细胞和正常结肠细胞表型的影响，以及分析RACK1表达上调对结肠癌细胞c-Scr信号通路性和HIF-1转录因子活性的影响及其与癌细胞恶性表型的关系；最后采用靶向蛋白质组学技术分离鉴定结肠细胞中RACK1的互作蛋白，并采用生物信息学解析其生物学意义，以发现RACK1的互作蛋白网络和涉及的信号通路。项目研究不仅有助于揭示RACK1表达下调/缺失在结肠癌发病中的作用及其机制，而且能为RACK1作为结肠癌的潜在抑瘤蛋白以及防治结肠癌的靶标提供科学依据。

活化蛋白激酶 C 受体-1 (RACKl) 异常表达与多种肿瘤的发生和转移密切相关。为探讨RACKl在大肠癌发病中的作用及其机制，项目首先采用免疫组化染色方法检测RACKl在大肠癌癌变过程中以及在不同转移潜大肠癌中的表达，然后建立RACKl 表达上调以及表达下调的结肠腺癌细胞系，再以建立的细胞系为样本，分析 RACK1 表达改变对结肠癌细胞体外和体内致瘤性以及信号通路活性的影响。. 通过研究，我们证实RACK1在大肠腺癌癌变过程中进行性上调，RACK1上调增强结肠腺癌细胞的裸鼠体内致瘤性；发现RACK1上调增强结肠腺癌细胞的增殖和停泊非依赖性生长，促进结肠腺癌细胞G1-S期演进以及抑制结肠腺癌细胞的凋亡，这些结果说明RACK1在大肠癌癌变过程中行使瘤基因的功能。另外，我们的免疫组化染色结果显示，RACK1高表达抑制大肠癌的淋巴结转移、促进大肠癌的分化，提示当肿瘤形成后，RACK1在大肠癌中发挥抑瘤基因的作用。在机制方面，RACK1上调可能通过激活JNK信号通路促进结肠癌的发生，而通过抑制AKT信号通路抑制结肠癌的转移。研究结果提示，RACK1 异常表达在大肠癌发生与转移中具有重要作用，RACK1 高表达通过促进细胞增殖和G1-S期演进以及抑制细胞凋亡而参与大肠癌的癌变，这为RACK1作为防治结肠癌的靶标提供了科学依据。