新人类肿瘤转移抑制基因的分离

为分离转移抑制基因或相应的DNA序列，应用DNA转染技术，将正常人基因组DNA随机切短后与PSU2mw共转染自己建株的高转移小鼠肺癌细胞内，克隆筛选转移表型囬复突变细胞株，应用Alu-PCR技术将插入该细胞中的人源DNA片段扩增出来，以此做为探针，细细胞原位PCR验证所扩增片段确为插入小鼠肺癌细胞中的人源性DNA片段。将其中的Fob bp人DNA重组的构建到PGEM-T载体后，进行核苷酸序列分析，通过Intnet检索Gemebamk序列数据库，未发现与之同源的人DNA序列，现已被数据库，登录号为P（t）F12 U67835，将此DNA片段再次转染高转移细胞后，生物学功能实验去验证该片段的转移及调控作用。此外以此片段为探针经文库筛选及染色体原位杂交以获全基因及定位。