负性协同刺激分子Tim3和PD-1在肿瘤浸润T淋巴细胞共表达的调节及介导肺癌免疫逃逸的机制

T细胞介导的免疫应答是机体抗肿瘤免疫的基础，肿瘤浸润T淋巴细胞的类型和功能决定了机体对肿瘤免疫监视的结局，而负性协同刺激分子的参与使T细胞应答更为复杂。本课题以申请者前期发现肺癌肿瘤浸润T淋巴细胞共表达负性协同刺激分子Tim3和PD-1为切入点，以非小细胞肺癌为研究对象，结合临床、体外和动物实验，探讨肺癌肿瘤浸润T淋巴细胞共表达Tim3和PD-1的临床和生物学意义，并进一步分析Tim3、PD-1在肺癌肿瘤浸润T淋巴细胞表达的可能调节机制和关键分子,以期揭示肿瘤浸润T淋巴细胞共表达Tim3、PD-1而介导T细胞耗竭/功能障碍继而参与肿瘤免疫逃逸的机制，为以干预Tim3/PD-1信号为基础的肿瘤免疫治疗提供新的理论基础和靶点。

T细胞介导的免疫应答是机体抗肿瘤免疫的基础，肿瘤浸润T淋巴细胞的类型和功能决定了机体对肿瘤免疫监视的结局，而负性协同刺激分子的参与使T细胞应答更为复杂。近年来负性共刺激分子和肿瘤免疫逃逸的关系备受关注。本项目引入T细胞功能耗竭的观点，以本课题组前期所发现肺癌组织中存在而外周血不存在的一群共表达负性共刺激分子Tim-3和PD-1的肿瘤浸润T淋巴细胞亚群为切入点，以非小细胞肺癌为研究对象，首先结合临床和体外实验，证实非小细胞肺癌患者肿瘤组织TILs表面Tim-3的表达明显上调，且Tim-3和PD-1在CD4+TILs和CD8+TILs呈现共表达，和Tim-3-CD4+和Tim-3-CD8+TILs相比，Tim-3+CD4+和Tim-3+CD8+TILs的IFN-的分泌明显下降，提示肿瘤局部大量无反应性T细胞的存在；且Tim-3在NSCLC患者肿瘤浸润CD4+T细胞的表达和肿瘤淋巴结转移及患者分期相关；进一步的分析显示，Tim-3并不组成性表达在外周血CD4+CD25+Foxp3+的调节性T细胞（Treg），而在肿瘤组织中，大约70% 的 Tim-3+CD4+ TILs 表达Foxp3且大约 60% 的Foxp3+ CD4+TILs 表达Tim-3，揭示了一群新的调节性T细胞的表型（Tim-3+Treg）。在深入探讨Tim-3、PD-1在非小细胞肺癌肿瘤浸润淋巴细胞的表达及其临床意义的基础上，分析了负性共刺激分子Tim-3在肿瘤浸润T淋巴细胞表达调节的可能关键影响分子，揭示了Tim-3分子在人非小细胞肺癌肿瘤微环境介导肿瘤免疫逃逸的可能新机制。继而进一步通过体内动物实验，阐明阻断Tim-3和PD-1信号通路可逆转肺癌肿瘤浸润T淋巴细胞的功能而有助于增强肿瘤免疫应答。进而制备鼠抗人Tim-3单克隆抗体，以期为以干预Tim-3/PD-1信号为基础的肿瘤免疫治疗提供新靶点和有潜在临床应用价值的物质基础。本项目的实施不仅为肿瘤免疫逃逸机制提供了新的理论基础，也为肿瘤免疫治疗治疗提供新的靶点和手段，具有一定的理论原创性和潜在的临床应用价值。