可溶性Toll样受体4抗结肠癌作用的机制研究

慢性炎症与肿瘤的发生发展密切相关，其中Toll样受体4(TLR4)与结肠肿瘤的发生和发展的关系最为明确，提示TLR4可能作为治疗结肠癌的靶标。可溶性TLR4（soluble TLR4，sTLR4），即TLR4的胞外段，可以阻断膜型TLR4与配体结合并进而阻断TLR4的信号传导和后续效应。然而，其在肿瘤治疗中的潜在应用价值和机制未有明确的评价和研究。本课题将利用重组的sTLR4研究其在体内外对肿瘤细胞和免疫细胞的影响，并且探讨其对AOM/DSS结肠炎相关的结肠肿瘤模型的预防和治疗作用，探讨其在CT-26荷瘤小鼠模型以及HT-29、SW480裸鼠荷瘤模型中的治疗作用和相关的细胞/分子机制，并优化sTLR4的应用策略和方法，阐明sTLR4作为新型肿瘤生物治疗制剂的有效性和可能机制。

结直肠癌（Colorectal cancer，CRC）侵袭性强并与TLR4-MD-2通路密切相关。Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）和髓样分化蛋白2（ myeloid differentiation protein 2，MD-2）在人类CRC中表达明显增高。分泌型的TLR4胞外段（sTLR4）和MD-2可能在结合细菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）中具有重要的作用。我们成功的合成了sTLR4，MD-2蛋白和sTLR4/MD-2复合物。这种复合物能够与膜表面的TLR4竞争性结合LPS。在体内外，sTLR4/MD-2复合物可以明显降低LPS引起的促炎分子和转移相关因子的产生（P<0.05）。并且可以抑制人类CRC细胞系的细胞周期、迁移和侵袭能力。在小鼠的荷瘤模型和腹腔种植转移模型中，该复合物能够对小鼠起到一定的保护作用。表现为sTLR4/MD-2复合物组的小鼠肿瘤更小，体重无明显改变，炎性因子表达更低（P<0.05）。另外，我们用氧化偶氮甲烷葡聚糖硫酸钠盐（azoxymethane/dextran sulfate sodium salt ，AOM/DSS）模型鼠来模拟慢性肠炎相关癌症。在此模型中，AOM/DSS引起的肿瘤也同样可以被sTLR4/MD-2复合物所抑制。我们的研究表明，sTLR4/MD-2复合物可以通过竞争性结合LPS来抑制CRC的发生发展，是一种新型的CRC预防保护剂，为临床CRC的治疗提供新的策略。