以Ⅰ、Ⅲ期果实SSH差异cDNA文库经酵母展示研究葡萄糖分积累启动前后糖载体基因的表达

葡萄(Vitis vinifera L.)果实生长为双S型曲线，Ⅰ、Ⅲ期是果实的膨大期，具有很强的库势，是吸收光合同化物的主要时期。Ⅰ期果实细胞无明显糖分积累，Ⅲ期果实以己糖在液泡中迅速积累为特征。葡萄光合同化物以蔗糖形式运输，进入果肉细胞被分配、利用、贮藏需通过转化酶的作用和单、双糖载体进行往返跨膜转运。Ⅲ期浆果细胞液泡持续积累己糖，是否由于定位于质膜与液泡膜的不同糖载体的表达与活性差异，构成影响糖分在细胞内分配、区隔、积累与通量的控制？本研究以葡萄前后2个膨大期的果实为材料，以SMART和抑制性消减杂交(SSH)技术构建果实Ⅰ、Ⅲ期正反消减差异cDNA文库，富集果实累糖启动后转录组差异基因，筛选糖载体阳性克隆，分析累糖相关基因的表达，以酵母展示体系验证阳性克隆的糖载体活性。探索Ⅰ、Ⅲ期葡萄果实单双糖转运载体的基因表达差异，及其与果实糖分积累的关系，进一步阐释果实糖分积累与载体调控机制。