骨髓微环境中的miR-126在急性髓细胞白血病干细胞中的功能研究

Leukemia stem cells (LSCs) are responsible for acute myeloid leukemia (AML) primary chemotherapy resistance and relapse following transient complete remission.ITD mutation of FLT3(Fms-like tyrosine kinase 3) (FLT3-ITD+) is one of the most common mutation in AML. Consistent with other studies, we found miR-126 knock down can increase AML LSC cell cycle and cell apoptosis, reduce cell growth, and have higher effect on FLT3-ITD+ AML LSC.So we proposed that miR-126 can maintain LSC activity and function, targeting miR-126 can eliminate LSC in AML, especially with FLT3-ITD mutation.We further confirmed that endothelial cells in bone marrow niche supple miR-126 to LSC. A novel miR-126 inhibitor(CpG-miR-126 inhibitor) that we have recently designed and synthesized show that is safe, non-toxic and highly effective in combination with tyrosine kinase inhibitors (TKI) to eliminate LSC in FLT3-ITD+ AML in vitro. In this study, we plan to confirm the endogenous and exogenous role of miR-126 in eliminating leukemia stem cell in acute myeloid leukemia with FLT3-ITD mutation in vivo, which can supple the theoretical basis for CpG-miR-126 inhibitor treatment and we will also confirm anti-leukemia activity and safety of CpG-miR-126 inhibitor alone and in combinations with TKI in treatment of FLT3-ITD+ AML, preparing for the stage I clinical trial.

白血病干细胞（LSC）的持续存在是AML原发耐药或短暂缓解后复发的主要原因。FLT3-ITD突变是成人AML患者最常见的突变之一。我们发现抑制miR-126表达可以促进AML LSC进入细胞增殖期，促进细胞凋亡，减少细胞增生，此作用对FLT3-ITD+AML LSC更强，推测靶向miR-126可能是清除LSC尤其是FLT3-ITD+AML LSC的有效途径。进一步发现骨髓微环境内皮细胞提供miR-126给LSC，新的CpG-miR-126抑制剂安全有效并可加强TKI的杀死作用。本课题在此基础上拟通过体内实验探求内源性及外源性miR-126在FLT3-ITD+AML LSC的不同功能,为CpG-miR-126抑制剂治疗FLT3-ITD+AML提供理论基础，证明CpG-miR-126抑制剂单药及联合TKI治疗FLT3-ITD+AML的有效性及安全性，为开展I期临床试验奠定基础。

白血病干细胞（LSC）的持续存在是AML原发耐药或短暂缓解后复发的主要原因。FLT3-ITD突变是成人AML患者最常见的突变之一。我们发现抑制miR-126表达可以促进AML LSC进入细胞增殖期，促进细胞凋亡，减少细胞增生，此作用对FLT3-ITD+AML LSC更强，推测靶向miR-126可能是清除LSC尤其是FLT3-ITD+AML LSC的有效途径。进一步发现骨髓微环境内皮细胞提供miR-126给LSC，新的CpG-miR-126抑制剂安全有效并可加强TKI的杀死作用。本项目通过体内外实验探求内源性及外源性miR-126在FLT3-ITD+AML LSC的不同功能, 并进一步使用CpG-miR-126抑制剂单药及联合TKI治疗FLT3-ITD+AML的有效性及安全性。研究结果显示体内外实验证实miR-126减少可清除FLT3-ITD+AML LSC，并促进LSC进入细胞增殖周期，促进细胞凋亡以及使细胞增生减少，延长生存；且体内外研究进一步显示骨髓微环境内皮细胞miR-126减少使AML LSC凋亡增加，从而减少白血病负荷，延长生存。体内外实验进一步证实CpG-miR-126抑制剂单药及联合TKI制剂AC220治疗FLT3-ITD+ AML可使白血病负荷减少，生存延长，且对野生型小鼠无明显毒副作用。因此，项目的研究结果显示骨髓微环境外源性提供miR-126对维持FLT3-ITD+AML LSC有重要作用，是清除FLT3-ITD+AML LSC的一个重要靶点。 CpG-miR-126抑制剂单药及联合TKI制剂AC220治疗FLT3-ITD+ AML的有效且安全，可为开展I期临床试验奠定基础。