补肾活血法治疗帕金森病的作用机制研究

Parkinson's disease (PD) is a kind of brain degenerative disease, and also a refractoriness disease, which clinical features including static tremor, myotonia, slow movement and abnormal gesture. But owing to its unclear etiological factor, there are no specific cure and drugs for PD at present days. In our clinical study on treating PD with therapy of Bushen Huoxue, the results showed that it could evidently ameliorate the clinic symptoms of the PD patients. And in the former research supported by the National Science Foundation of China, we gained satisfactory effects in animal experiment with therapy of Bushen Huoxue treating PD. The results showed that it could markedly facilitate the repair of injured substantia nigra cells and has protection effect of nerve. But the role of pathway for it treating PD is unclear.Recently studies showed that the protection effect has relations with adenosine A2A receptor (A2A), vesicular monoamine transporter (VMAT2), divalent metal transporter 1 (DMT1) and nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) probably.So based on the former results, in this study we will explore the mechanisms of action in the treatment of PD model animal with therapy of Bushen Huoxue, mainly including the change of pathological morphology of brain tissue and the expression of A2A, VMAT2, DMT1 and Nrf2.

帕金森病（Parkinson's disease,PD）是以静止性震颤、肌强直、运动迟缓和姿势异常为临床特征的脑退行性疾病，属疑难难治性疾病，其病因及发病机制尚未明了，目前缺乏根治方法。我们采用补肾活血法治疗PD能显著改善患者的临床症状。在前一个国家自然科学基金课题研究中，发现补肾活血中药能促进PD模型动物黑质细胞修复，具有神经保护性作用，但其具体作用途径与环节尚不明确。最新研究显示，其神经保护作用可能和腺苷A2A受体、囊泡单胺转运体(VMAT2)、二价金属离子转运蛋白1（DMT1）以及核因子E2相关因子2（Nrf2）有关。由此，本项目拟在前期研究基础上，应用PD动物模型，通过补肾活血中药对其干预后，观察脑组织病理形态学改变及腺苷A2A受体、VMAT2、DMT1以及Nrf2等变化以明确作用途径，进一步阐明其作用机制。

探讨补肾活血法治疗帕金森病的作用机理。[方法]：应用公认的帕金森（PD）病大鼠模型，设立正常对照组、PD模型组、补肾活血中药治疗组，观察：大鼠旋转行为变化，补肾活血法干预前后大鼠脑内腺苷A2A、VMAT2、DMT1，脑组织Bcl-2、Bax、等的变化；测定大鼠黑质Nrf2、NQO1、HO-1、5-HT和BDNF的含量变化。[结果]：研究显示，中药治疗组较模型组大鼠旋转行为明显改变。与正常对照组比较，PD模型组大鼠纹状体A2A蛋白含量明显高于正常对照组（P<0.05），大鼠脑黑质中A2A蛋白无表达；模型组黑质和纹状体中DMT1蛋白明显高于正常组（P<0.05）；模型组黑质和纹状体中VMAT2蛋白明显低于正常组（P<0.05）；模型组黑质和纹状体中Bcl-2蛋白明显低于正常组（P<0.01）；模型组黑质和纹状体中Bax、Fas、FADD、Tau蛋白明显高于正常组（P<0.01）；模型组黑质中Trkb、VEGF蛋白与正常组表达接近无差别（P>0.05），模型组纹状体中Trkb蛋白明显高于正常组（P<0.01）；模型组黑质中Nrf2、NQO1、5-HT、BDNF蛋白均明显低于正常组（P<0.01）；模型组黑质中HO-1蛋白明显低于正常组（P<0.05）。经补肾活血中药干预后，治疗组纹状体A2A蛋白含量明显低于模型组（P<0.05）；治疗组黑质和纹状体中DMT1蛋白表达明显低于模型组（P<0.05）；治疗组黑质和纹状体中VMAT2蛋白表达明显高于于模型组（P<0.05）；治疗组黑质和纹状体中Bcl-2、Trkb、VEGF蛋白表达明显高于模型组（P<0.01）；治疗组黑质和纹状体中Bax、Fas、FADD、Tau蛋白表达明显低于模型组（P<0.01）；治疗组黑质中Nrf2、NQO1、HO-1、BDNF蛋白表达明显高于模型组（P<0.01）；治疗组黑质中5-HT蛋白表达明显高于模型组（P<0.05）。[结论]：补肾活血法治疗PD的作用机理可能与黑质纹状体中腺苷A2A、VMAT2、DMT1、Bcl-2、Bax、Fas、FADD、VEGF、Trkb、Tau、Nrf2、NQO1、HO-1、5-HT和BDNF含量的调节有关。