甲亢细胞对放射性131碘辐射敏感个体性差异的基因机制研究

放射性131碘治疗甲亢疗效好、复发率低，已经成为临床治疗甲亢的主要方法。然而治疗后甲减发生率较高，是甲亢患者接受131碘治疗最主要的顾虑。目前应用的各种131碘治疗甲亢的剂量方法中,尚没有一种能避免甲减地发生。这主要是因为131碘治疗甲亢的效果主要与辐射敏感的个体差异性有关，但是对于131碘辐射个体敏感性迄今尚未找到特异性的检测手段。若能找出个体对于131碘辐射敏感性有指示性意义的指标，那么对于治疗方案的确定将有很重要的意义。这不仅仅可以减低甲减的发生几率，同时可改善131碘治疗甲亢的疗效，为甲亢131碘个体化治疗方案的提出提供理论基础。基于前期工作的基础上，本课题组提出辐射敏感基因可能与个体辐射敏感性密切相关。本研究即对一系列辐射敏感基因的表达与131碘照射后细胞凋亡指数进行相关性分析，旨在找出与甲状腺组织131碘辐射敏感性相关性基因，为临床治疗效果提供预测性指标。

131I治疗甲亢（GD）主要是依赖于甲状腺组织对131I的特异性摄取。GD患者对131I治疗的反应不一，疗效差异较大，有可能与特异性基因决定的个体敏感性的不同有关。针对不同的个体的辐射敏感性，采用不同的剂量治疗才可以提高131I治疗GD的效率，降低甲状腺功能减退症的发病率。辐射射线可导致严重的DNA损伤。细胞通过细胞修复、细胞周期阻滞或细胞凋亡等非常精密的调控机制对此作出反应, 其中细胞凋亡是电离辐射所致细胞死亡的主要形式。目前有关辐射诱发细胞凋亡的研究大多集中在X/γ射线, 而放射性核素内照射β-射线诱发细胞凋亡的研究报道不多。.本研究即采用分子生物学实验技术，研究放射性核素131I内照射β-射线诱导的甲状腺 HTori 3 细胞凋亡、剂量效应关系和相关凋亡基因在其中的表达, 探讨内照射放射性核素131I诱发 HTori 3细胞凋亡的放射毒理效应的分子机理；继而我们检测了细胞凋亡通路上重要相关基因在GD组织及正常甲状腺组织的表达水平，探讨基因表达水平与GD 131碘治疗后治疗效果的关系。结果表明：1）131I能够诱导Htori 3细胞凋亡与G2/M期阻滞。随着作用时间延长及作用剂量的加大，细胞凋亡率及G2/M期细胞所占比率均有所增加，抗凋亡基因Bcl-2表达降低，促凋亡基因Fas表达增加，细胞周期阻滞相关基因 Gadd45αmRNA表达水平明显增加。2）凋亡基因ATM、p53、Bcl-2、NF-κB、EGFR、Egr-1及Ku70在正常甲状腺组织及GD组织中都有不同程度的表达。GD患者组织中EGFR的表达水平明显高于正常组织，而NF-κB，Bcl-2的表达水平明显低于正常组织。3）Egr-1在早发甲减组呈高表达，而Bcl-2呈低表达。Logistic回归分析显示Egr-1和Bcl-2是Graves病131碘治疗早发甲减发生的主要影响因素。由此我们得出结论：1）131I能够通过诱导甲状腺HTori 3细胞凋亡与G2/M阻滞抑制细胞增殖，而且具有时间及剂量依赖性。Bcl-2及Fas均参与了131I诱导HTori 3细胞凋亡的过程，而且是通过线粒体途径及死亡受体途径共同实现的。2) Ku70、EGFR、NF-κB、Bcl-2介导的信号传导通路可能参与了Graves病的发生、发展过程。3）Egr-1和Bcl-2可能作为Graves病131碘治疗早发甲减发生的预测因子，