基于兔肺癌模型建立DTX-LP肺靶向作用与疗效评价体系

本课题以临床用DTX注射液治疗NSCLC缺乏肺靶向性且毒性大为切入点，创建粒径0.8μm带负电荷脂质体的DBaumNC专利新技术，制备DTX-LP，试验发现，该脂质体将92% DTX传至肺部；在裸鼠肺癌模型上提高DTX疗效9.6倍；在兔肺癌模型上，以DTX注射液1/3剂量，能提高其生存期近一倍。.本课题形成了以"膜脂相似、带负电荷、粒径点八、主动机制、肺靶向性、安全性好、高效低毒"的学术思想，提出了粒径约0.8μm带负电脂质体具有高度肺靶向性且临床使用安全性高的新观点，拟开展研究方面有四：1.放射性核素标记或未标记不同粒径下带不同电荷DTX-LP的制备及表征；2. 构建兔VX2肺癌模型；3. 研究DTX-LP的肺靶向抗癌治疗作用；4. DTX-LP的肺靶向作用机制研究，建立肺靶向抗癌治疗的评价体系，为开发具有自主知识产权高度肺靶向DTX-LP提供理论依据，必将具有重要的科学意义和实用价值。

本课题以临床用DTX注射液治疗NSCLC缺乏肺靶向性且毒性大为切入点，创建粒径0.8μm带负电荷脂质体的DBaumNC 专利新技术，制备DTX-LP，能将92% DTX传至肺部；在裸鼠肺癌模型上提高DTX疗效9.6 倍；在兔肺癌模型上，以DTX注射液1/3 剂量，能提高其生存期近一倍。.本课题按计划进行，完成了计划的四项工作：1.放射性核素标记或未标记不同类型DTX-LP的制备与表征。本研究建立了以固体分散技术与泡腾技术组合制备DTX-LP的新技术，经不同粒径和表面电荷的DTX-LP体内组织分布研究，以肺靶向性为指标确定了最佳处方及工艺。成功进行了核素对DTX-LP进行标记。这为后续研究和质量评价体系奠定了基础。2.构建兔VX2肺癌模型。本项研究采用微创手术，通过胸腔穿刺接种肿瘤组织块，成功构建兔VX2肺癌动物模型。该方法简便易行、不良反应轻、肺部成瘤率及模型成功率高，适用于快速、大批量、集中制作兔VX2肺癌动物模型，可满足肺靶向性抗癌药物药效学评价的需要。3. 基于兔VX2 肺癌模型的DTX-LP 肺靶向抗癌治疗作用及其评价体系。本研究采用完全随机设计，将BLA-LP、DTX-IN、DTX-LP（高剂量、中剂量和低剂量）分别经耳缘静脉注射给药，通过比较实验兔各时间点生存率、中位生存时间以及体重变化率等以评价各治疗组的疗效。同时，观察了给药前后兔白细胞、中性粒细胞计数变化率、胃肠道、继发感染所致发热和泪液分泌增加等不良反应的发生率及其严重程度。并且以主要脏器的组织病理切片检查结果评价各治疗组的毒副作用。其结果表明：DTX-LP高剂量组明显优于DTX-IN组，它不仅提高动物各时间点生存率，延长了动物生存时间近1倍，而且不良反应轻微，明显改善了动物生存期生活质量。4.研究DTX-LP的肺靶向作用机制。本研究采用的DBaumNC专利技术成功制备了锝[99mTc]标记的DTX-LP（DTX-LP-Tc），用SPECT/CT技术对DTX-LP-Tc与游离锝（99mTc）在兔体内分布比较，结果证明DTX-LP-Tc主要浓集在兔肺部，具有高度的肺靶向性。.综上所述，本课题成功构建了制备不同类型DTX-LP的方法，经实验证实并提出带负电荷DTX-LP（约0.8μm）具有高度肺靶向作用的新观点，这有助于肺靶向脂质体制剂技术平台构建，为肺癌治疗带来新的突破与尝试，具有重要的临床意义。