脱管散对金黄色葡萄球菌生物膜形成的干预及机理研究

金黄色葡萄球菌是慢性难愈性创面、内固定物感染的常见致病菌，此致病菌在创面、内固定物表面容易形成生物膜，通常需要创面负压引流、内固定物移除，给患者造成二次创伤。脱管散为我院院内制剂，20多年临床应用证实，该药安全、毒性小，能促进感染创面愈合，对内固定物感染具有良好的治疗作用。基于此，本研究拟建立慢性难愈性创面及内固定物金黄色葡萄球菌感染动物模型，观察创面周围炎症情况、创面愈合时间、创面愈合率、创面的细菌学检查；观察内固定物周围金黄色葡萄球菌生物膜的微观形态、计数菌落、病理观察和细胞外多粘质物质含量。通过脱管散对葡萄球菌生长、对生物膜形成过程、对葡萄球菌初始粘附、对葡萄球菌形成相关基因表达的影响，全基因表达谱分析脱管散对葡萄球菌的影响，探讨脱管散对金黄色葡萄球菌生物膜形成的干预作用及机理。为该药防治内固定物感染、促进感染创面愈合提供实验依据，为进一步临床推广应用奠定基础。

金黄色葡萄球菌是慢性难愈性创面、内固定物感染的常见致病菌，此致病菌在创面、内固定物表面容易形成生物膜，通常需要创面负压引流、内固定物移除，给患者造成二次创伤。脱管散为我院院内制剂，20多年临床应用证实，该药安全、毒性小，能促进感染创面愈合，对内固定物感染具有良好的治疗作用。基于此，本研究拟建立慢性难愈性创面及内固定物金黄色葡萄球菌感染动物模型，观察创面周围炎症情况、创面愈合时间、创面愈合率、创面的细菌学检查；观察内固定物周围金黄色葡萄球菌生物膜的微观形态、计数菌落、病理观察和细胞外多粘质物质含量。通过脱管散对葡萄球菌生长、对生物膜形成过程、对葡萄球菌初始粘附、对葡萄球菌形成相关基因表达的影响，全基因表达谱分析脱管散对葡萄球菌的影响，探讨脱管散对金黄色葡萄球菌生物膜形成的干预作用及机理。为该药防治内固定物感染、促进感染创面愈合提供实验依据，为进一步临床推广应用奠定基础。本项实验研究表明,在一定剂量范围和有效观察时间内, 脱管散对破损皮肤大鼠均无严重系统吸收毒性,及破损皮肤刺激反应。脱管散对慢性创面中金黄色葡萄球菌有清除作用。脱管散可以改变慢性创面分泌物的PH值，酸化创面。脱管散可调节慢性创面愈合过程中EGF、VEGF的表达。脱管散能够促进慢性创面的愈合，其促愈机制可能与其酸化创面、清除创面细菌及适时上调慢性创面愈合过程中EGF、VEGF的表达有关。脱管散对内固定物感染金黄色葡萄球菌生物膜体外模型感染、形态结构有抑制作用。脱管散对内固定物感染金黄色葡萄球菌生物膜的创面有促进愈合的作用。脱管散在体外可以抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成、破坏已形成的成熟金黄色葡萄球菌生物膜。体外实验的结果显示，它具有杀伤金黄色葡萄球菌ATCC25923和Newman株的活性。并且，它还能抑制ATCC25923生物膜的形成，以及破坏已经形成的生物膜。它的这些活性并不逊色于青霉素。相关机制的初步研究中，参与生物膜形成的关键基因的表达并不受其影响。因此，机制还需进一步深入研究。