黄芩活性成分对金黄色葡萄球菌生物膜干预作用及其机制的研究

金黄色葡萄球菌（S.a）是引起慢性肺部感染、医学材料相关感染等疾病的常见病原体，该感染具有高致死性和难治性的特点，这与细菌生物膜（BF）的形成有密切关系。 S.a的BF形成与胞间粘附素（PIA）和密度感应系统（QS）有关。因此，本研究在我课题组前期已筛选出的临床常见的可形成BF的S.a菌株的基础上，选用黄芩活性成分（黄芩苷、黄芩素）干预S.a的BF，采用生物膜半定量、藻酸盐含量检测、扫描电镜（SEM）、活菌计数等方法，观察药物对S.a生物膜的抑制和破坏作用,及其与其它抗生素的协同杀菌作用；采用琼脂凝胶扩散法、多重PCR、Western blot等方法检测相关毒性因子和PIA的表达；通过PCR法检测PIA相关基因ica和QS相关基因agr、sarA，从而在分子水平和基因水平上，探讨黄芩活性成分（黄芩苷、黄芩素）对S.a生物膜干预作用的机制。

金黄色葡萄球菌（S.a）是引起慢性肺部感染、医学材料相关感染等疾病的常见病原体，该感染具有高致死性和难治性的特点，这与细菌生物膜（BF）的形成有密切关系。S.a的BF形成与胞间粘附素（PIA）和密度感应系统（QS）有关。本项目在前期已筛选出临床常见的可形成BF的S.a菌株的基础上，通过活菌计数定量法和激光扫描共聚焦显微镜及扫描电镜定性法，发现黄芩活性成分（黄芩苷、黄芩素）可以有效抑制体外S.a生物膜的形成，并可以破坏已形成的BF,同时分别与头孢唑林、左氧氟沙星和万古霉素有协同杀菌作用；通过WB、PCR等方法发现，其还可以抑制毒力因子肠毒素A、α-溶血素、凝固酶的产生并促进耐热核酸酶产生；可以抑制PIA相关基因ica和QS相关基因agr、sarA、RNAIII的表达。因此，本实验说明黄芩苷、黄芩素可以在分子水平和基因水平上抑制金黄色葡萄球菌的QS系统，干预生物膜合成相关基因的表达，从而使细菌生物膜形成受限，并使QS系统相关毒力因子的产生明显减少。