抗9.1C3分子细胞内抗体构建的研究

9.1C3是用人NK细胞免疫小鼠所制备的一株单克隆抗体，它显著抑制NK、LAK等杀伤细胞对靶细胞的细胞毒作用。9.1C3scFv为模板，通过PCR扩增引入内质网定位KDEL序列，得到9.1C3胞内抗体基因。构建真核表达载体后，转入Jurkat细胞观察到胞内抗体能下调9.1C3分子的表达，这些结果表明我们成功地获得9.1C3的胞内抗体基因，对9.1C3分子功能的研究。我们采用公认的确定NK细胞刺激型和抑制型受体的方法一重导向杀伤实验（redirect killing assay ,RKA）。结果发现9.1C3抗体能抑制CD16、CD2等活化型受体介导NK细胞对P815的杀伤作用，并抑制杀伤过程中NK细胞TNF-α的分泌，抗体的抑制作用呈浓度依赖方式，这表明9.1C3分子是一种抑制型KN细胞受体。