规模合成人乳岩藻糖基化寡糖的工程菌构建及代谢调控的研究

人乳寡糖作为一类特殊结构的糖类物质，可作为上皮细胞的可溶性受体类似物，参与母乳喂养婴儿非免疫防御体系的增强，以人乳寡糖及类似物为原料制备抗粘附药物成为当前药物开发的一大热点。鉴于采用天然提取、化学合成及转基因动物方法生产人乳寡糖分别存在原料匮乏、供体昂贵及技术障碍等诸多问题，本研究利用分子生物学技术构建代谢工程菌株E.coli B1、B2、B3，高效表达己糖激酶、磷酸甘露糖变位酶、甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶、GDP-甘露糖4,6-脱水酶、GDP-4-酮-6-脱氧甘露糖3,5-变旋酶/4-还原酶、α1,2-岩藻糖基转移酶等关键酶，继以甘露糖、乳糖（乙酰化乳糖）为前体，利用代谢工程菌E.coli B1、B2、B3，辅以GTP能量提供菌株C.ammoniagenes，进行多菌耦合发酵，实现α1,2-岩藻糖基化人乳寡糖的规模合成，为生产人乳寡糖提供有效途径，同时也为天然寡糖药物开发提供原料。