Nrf2/ARE氧化应激信号通路在耐药性癫痫发病中的作用及其机制

Epilepsy is one of the most common and freuent neurologic diseases , among which the drug-resistant one is responseless to treatment, and has a complicated mechanism remaining not clear. Oxidative stress effects in multiple neurodegenerative diseases. Recent reserch point out its important role in epilepsy especiaaly drug-resistant type. Nrf/ARE pathway as a classical oxidative injury associated pathway has shown its relationship with non-drug-resistant epilepsy. With all those clues above we suspect this pathway may join in the mechanism of the drug-resistant type. We plan to set a animal model of drug-resistant epilepsy, use the techniques of behavior observation, EEG, patch clap, western-blot etc. to investigate the role of Nrf/ARE pathway in mechanism of this disease and the treatment effect and molecular mechanism by modifying and regulating the pathway. We hope to better clarify the mechanism of disese and provide new viewsight and evidence for its treatment.

癫痫为神经科常见病与多发病，其中耐药性癫痫疗效差，其发病机制复杂，目前尚不清。氧化应激参与多种神经系统变性病的病理生理机制，最近研究发现其在癫痫，特别是耐药性癫痫的发生发展中亦有显著作用。而Nrf2/ARE 信号通路作为细胞内氧化损伤的经典通路，已有研究初步发现其与非难治性癫痫发病机制相关。综上我们猜测该通路很有可能参与了耐药性癫痫的发病机制。本课题通过制备耐药性癫痫动物模型为研究对象，应用行为学观察、脑电图技术、膜片钳技术、蛋白组学等研究方法，施以转基因、信号通路激活/阻滞剂等干预手段，观察研究Nrf2/ARE通路参与耐药性癫痫的发病机制，以及通过调节该通路对耐药性癫痫治疗作用及其分子机制。以期更进一步阐明此病的机制，并为其治疗方案提供新的视角和依据。

癫痫为神经科常见病与多发病，其中耐药性癫痫疗效差，其发病机制复杂，目前尚不清。氧化应激参与多种神经系统变性病的病理生理机制，最近研究发现其在癫痫，特别是耐药性癫痫的发生发展中亦有显著作用。而Nrf2/ARE信号通路作为细胞内抗氧化损伤的经典通路，已有研究初步发现其与非耐药性癫痫发病机制相关。综上我们猜测该通路很有可能参与了耐药性癫痫的发病机制。.本课题通过制备耐药性癫痫动物模型为研究对象，应用行为学观察、脑电图技术、膜片钳技术、蛋白组学等研究方法，施以转基因、信号通路激活/阻滞剂等干预手段，观察研究Nrf2/ARE通路参与影响耐药性癫痫发病的机制，以及通过调节该通路对耐药性癫痫治疗作用及其分子机制。.通过本课题的研究，我们发现加用Nrf2/ARE信号通路激动剂的实验动物造模成功率低且耗时显著延长。发现耐药性癫痫实验动物较之正常对照，脑组织及血清中的氧化应激中间产物均存在差异，而加用Nrf2/ARE信号通路激动剂的实验动物其检测物水平介于二者之间，包括抗氧化酶活性[超氧化物歧化酶（SOD），过氧化氢酶（CAT），谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）]，破坏分子丙二醛（malondialdehyde，MDA)及有利产物谷胱甘肽(glutathione，GSH)水平）等。通过Nrf2/ARE通路激动剂的激活，耐药性癫痫海马神经元的癫痫波发放较使用阻滞剂组及癫痫未用药组均显著减少，且前者具统计学意义。此外以Nrf2基因敲除小鼠行耐药性癫痫造模后发现其较之野生型癫痫发作程度更重。对于野生型组，该通路激动剂的使用可改善癫痫发作情况，但对于基因敲除组，激动剂使用未能改善癫痫发作。.综合上述研究结果，我们证实了立项初时提出的假设，即Nrf2/ARE氧化应激信号通路参与了耐药性癫痫的发生发展机制。通过上调该信号通路可缓解耐药性癫痫动物脑组织及血液中的氧化应激损伤，延缓致病过程，改善癫痫发作情况，从而提示通过调节这一信号通路可能可以进一步发现耐药性癫痫的药物治疗靶点，发挥潜在的临床治疗价值。