HPV16 E6、E7调节宫颈癌及食管癌细胞Survivin基因表达和生物学功能的研究

HPV感染细胞后，其早期表达的基因E6、E7通过改变细胞组蛋白乙酰化的活性状态调控细胞基因Survivin表达及生物学功能的研究仍属空白。本研究使用HPV16阳性/阴性宫颈癌细胞株，建立HPV16 E6、E7 基因沉默细胞克隆，通过对HPV16 E6、E7、HDAC的活性干扰，检测HDAC、Survivin基因转录及蛋白水平的变化及对细胞凋亡的影响。初步探明HPV16 E6、E7对Survivin的调控关系，确定组蛋白乙酰化状态的变化对以上调控的影响；构建HPV16 E6、E7真核表达载体，转染HPV阴性的宫颈癌和食管癌细胞株，确认E6、E7对Survivin表达及功能的调控关系并比较其在两个不同组织细胞中的差异，为进一步研究HPVE6、E7与Survivin之间的调控机理、认识HPV16感染诱发新疆维吾尔族宫颈癌和哈萨克族食管癌的早期分子生物学过程提供研究平台。

HPV感染细胞后，其早期表达的基因E6、E7通过改变细胞组蛋白乙酰化的活性状态调控细胞基因Survivin表达及生物学功能的研究仍属空白。本研究使用HPV16阳性/阴性宫颈癌细胞株，建立HPV16 E6、E7 基因沉默细胞克隆，通过对HPV16 E6、E7、HDAC的活性干扰，检测HDAC、Survivin基因转录及蛋白水平的变化及对细胞凋亡的影响。初步探明HPV16 E6、E7对Survivin的调控关系，确定组蛋白乙酰化状态的变化对以上调控的影响；构建HPV16E6、E7真核表达载体，转染HPV阴性的宫颈癌和食管癌细胞株，确认E6、E7对Survivin表达及功能的调控关系并比较其在两个不同组织细胞中的差异。我们已经构建了HPV16 E6E7克隆；建立了ECA109、KYSE450、C-33A细胞培养；对不同细胞进行了转染和诱导。细胞形态与生物学观察发现TSA诱导细胞凋亡、E7有更强的干扰细胞存活的能力；在TSA干预组，Survivin的表达随时间减弱，转录水平结果显示其表达受TSA干预影响，蛋白表达变化的检测正在进行中；NFkB等多个新发现的、重要的基因和环节参与了这一调控过程。HPV16 E6、E7 对肿瘤细胞Survivin的表达的调控关系在宫颈癌细胞株与食管癌细胞株之间无明显差异。这些结果将为进一步研究HPVE6、E7与Survivin之间的调控机理、认识HPV16感染诱发新疆维吾尔族宫颈癌和哈萨克族食管癌的早期分子生物学过程提供研究平台。