加味五子衍宗方对炎症反应中神经胶质细胞激活的抑制作用及机理研究

炎症反应是老年性痴呆的重要病理特征。前期研究发现加味五子衍宗方具有良好的抗痴呆作用，可显著抑制β淀粉样蛋白诱导的神经毒性，保护神经元。由于神经胶质细胞在老年性痴呆发病过程中可通过炎症反应诱导神经损伤，引发神经退变，本课题拟从胶质细胞所介导的神经毒性出发，利用体内外实验模型研究加味五子衍宗方对胶质细胞炎症反应的抑制作用及潜在机制。内容包括：①该方对体外培养胶质细胞炎症反应的抑制作用，及对NF-κB和MAPK(ERK, JNK, p38)炎症通路的影响；②该方在胶质细胞/神经元共培养体系中，对胶质细胞所诱导的神经元凋亡和相关通路（线粒体和死亡受体凋亡通路）的调节作用；③该方对大鼠在体炎症模型中神经元凋亡和胶质细胞激活的抑制作用及其机制。以期从胶质细胞炎症反应并诱导神经毒性的理论出发，深入探讨该方的神经保护机制，为该方今后在临床上合理的合理应用及中枢神经系统中药的活性研究提供方法和技术上的指导。

中枢神经系统慢性炎症是阿尔茨海默病的重要病理特征。慢性炎症不仅能引起神经炎性损伤，还可能是其他病理特征(老年斑和神经元纤维缠结)形成和发展的诱因。小胶质细胞是脑内主要的免疫效应细胞，其过度激活释放大量的炎症因子对神经元有损伤作用。NF-κB和MAPKs信号通路的激活与神经退行性疾病发展过程中所伴随的炎症反应密切相关。脂多糖 ( lipopolysaccharide, LPS ) 诱导BV-2细胞是体外神经炎症研究的经典模型。.加味五子衍宗方（Modified Wu-Zi Yan-Zong Priscription，MWP）是根据“补肾以益智”的中医理论，在五子衍宗丸的基础上加味淫羊藿组成。前期研究发现，MWP具有良好的抗痴呆和神经保护作用。为了进一步阐明MWP神经保护作用机制，北京大学第一医院王学美研究员等在国家自然科学基金（批准号：81173369）的资助下，对MWP及其有效组分在神经胶质细胞的炎症激活以及炎性损伤方面做了深入研究并取得了一系列重要成果。.研究发现，MWP及其有效组分可通过调节NF-κB通路的激活及抗氧化作用抑制LPS诱导BV-2细胞的炎症反应，其中50%醇提物抗炎效果优于MWP。MWP可抑制Aβ诱导的BV-2细胞得炎症激活，其作用机制涉及抑制NF-κB和P38/ERK MAPK通路的激活。另外，MWP以及有效组分可抑制LPS诱导的BALB/c小鼠大脑炎症反应，减少炎症蛋白表达。基于基因芯片研究分析，MWP对SAMP8早老化痴呆小鼠大脑影响机制涉及神经干细胞增殖分化和神经内分泌免疫网络调控。.五味子醇甲、五味子甲素是MWP中单味药五味子的主要活性成分，研究发现这两种化合物以及五味子总提物可抑制LPS激活的BV-2细胞、减轻胶质细胞与神经元共培养体系中的炎性损伤作用，其机制涉及NF-κB和MAPKs通路。其中五味子甲素可通过调节TRAF6蛋白的表达来调控NF-κB通路的激活，且对Jak2-Stat3通路的激活有抑制作用。.淫羊藿苷、淫羊藿次苷II（Icariside II，Ica II）是单味药淫羊藿中的主要活性成分，淫羊藿苷可通过抑制Tau蛋白磷酸化降低甲醛对SHSY5Y细胞的损伤作用。Ica II可抑制LPS诱导BV-2细胞的炎症反应，减轻胶质细胞与神经元共培养体系中的炎性损伤作用，抗炎机制涉及抑制TRAF6-IKKβ-NF-κB通路及JNK M