加味五子衍宗方黄酮类提取物诱导神经前体细胞系分化及其信号转导机制的研究

促进神经分化是近年治疗神经退行性疾病的研究热点。前期体内外研究证实补肾益精的加味五子衍宗方及其有效组分具有显著促智、抗衰老等脑保护作用。近期发现"加味方"总黄酮、及其君药淫羊藿、菟丝子的主要有效成分淫羊藿苷、金丝桃苷有类似NGF样诱导PC12分化的作用。而NGF诱导PC12分化的作用与激活MAPKs信号转导通路有关。本项目拟以公认的研究神经细胞分化的PC12细胞系为模型，采用RNAi、Western-blot、激光共聚焦、RT-PCR等方法，从基因、蛋白水平研究"加味方"总黄酮、金丝桃苷、淫羊藿苷在诱导PC12细胞分化过程中对MAPKs信号转导通路中ERK、JNK/SAPK、p38三条亚信号通路的影响，从而为中药复方复杂物质成分研究提供新的思路，弥补 "加味方" 黄酮类提取物从信号转导通路发挥脑保护作用的机理空白，并可能从"加味方"黄酮类提取物中发现类似NGF的小分子物质或者替代物。

促进神经分化是近年治疗神经退行性疾病的研究热点。本课题组前期体内外研究证实补肾益精的加味五子衍宗方及其有效组分具有显著促智、抗衰老等脑保护作用。本研究以神经前体细胞未分化的PC12细胞为研究对象，采用加味五子衍宗方总黄酮、单体有效组分淫羊藿苷、金丝桃苷为干预措施对未分化的PC12细胞进行干预，以探讨加味五子衍宗方中的有效组分是否具有类似NGF样诱导PC12分化的作用。研究发现（1）加味五子衍宗方总黄酮、淫羊藿苷、金丝桃苷具有延伸PC12细胞突起的作用，与低浓度NGF合用时可以加强低浓度NGF延伸突起的作用。（2）经上述药物诱导延长突起的PC12细胞中有神经标志物MAP-2的表达。（3）研究发现金丝桃苷可通过激活ERK/p38 MAPK通路和 Trk A信号通路发挥类似于NGF样的促PC12细胞分化的作用，而加味五子衍宗方黄酮及淫羊藿苷没有显著的激活ERK/p38 MAPK通路和 Trk A信号通路的作用。（4）研究发现加味五子衍宗方有效组分可以从拮抗氧化应激、缺氧、炎症、淀粉样蛋白神经毒性等多方面发挥神经保护作用。