益气活血中药联合丰富环境促进脑缺血后神经发生的作用及机制研究

中药治疗和环境干预均可影响临床和实验性卒中的康复过程，本项目在中医"天人相应"的整体思想指导下，基于前期研究基础，提出益气活血中药联合丰富环境促进神经干细胞迁移/功能化，进行内源性神经功能重建的构想。采用脑缺血再灌注损伤大鼠模型，以神经干细胞增殖/迁移为效应目标，使用响应曲面方法，优化补阳还五汤与丰富环境的联合方案，寻求最佳疗效组合。在此基础上，应用脑微透析技术、免疫荧光技术以及分子生物学相关技术，研究这一优化联合方法对室管膜下区神经干细胞增殖/迁移以及神经环路功能性重建的作用，通过主成分分析法及层次分析法建立数学模型进行综合评价。并从调控神经发生的Wnt/β-catenin信号通路进一步揭示其促进神经再生的内在机制。这项研究工作将推进环境干预在脑损伤康复中的治疗作用，为中药疗法和环境疗法的临床适时选择性应用及有机结合运用提供理论基础和实验依据。

缺血性脑卒中发生后，神经细胞大量死亡，神经网络的复杂联系受到严重损害，由此引发各种神经功能缺失症状。要修复受损的神经环路，重建神经功能，至关重要的是解决神经再生这一难题。本项目设计了补阳还五汤联合丰富环境的康复模式，提出益气活血中药联合丰富环境促进神经干细胞迁移/功能化，进行内源性神经功能重建的构想。研究证实益气活血中药联合丰富环境可诱导海马齿状回颗粒下层及缺血梗死灶周围皮层、纹状体神经元前体细胞增殖；并可增加梗死灶周围皮层移行的新生神经元；抑制海马、梗死灶周围皮层新生细胞向胶质细胞分化，促进皮层梗死灶周围新生神经元成熟。并通过上调突触可塑性相关蛋白、控制星形胶质细胞的异常活化促进脑缺血再灌注大鼠突触网络的重建。补阳还五汤联合环境干预不仅可促进肢体感觉功能康复，更有助于认知神经环路的重建，对促进认知康复具有十分重要的意义。为探索补阳还五汤联合丰富环境促进神经功能康复的分子机制。本项目进一步深入研究了Wnt/β-catenin通路关键信号分子在缺血再灌注大鼠脑组织的表达变化及Wnt1、β-catenin、Dishevelled蛋白、GSK-3β激酶与新生神经元之间的共定位关系，探讨补阳还五汤联合丰富环境调控Wnt/β-catenin通路关键信号分子对成年大鼠NSCs增殖、分化与细胞命运决定等过程中的作用，研究发现，Wnt信号分子在脑缺血再灌注大鼠不同脑区的新生细胞具有不同的表达模式，补阳还五汤联合丰富环境对Wnt1、β-catenin、Dishevelled、GSK-3β及Phospho-GSK-3β(Ser9)具有不同的调控作用，提示，补阳还五汤联合丰富环境促进神经发生与调控Wnt信号，开启和/或关闭Wnt/β-catenin通路中的关键信号分子有很大的关系。相关研究工作可为环境疗法的临床适时选择性应用及有机结合运用提供理论基础和实验依据。